Pāriet uz saturu
HNO258 šūnas
Audums
Mutes dobums
Slimība
Galvas un kakla plakanšūnu karcinoma (HNSCC)

Dokumenti

HNO258 šūnas

Cell line · Preces numurs 300146

Šūnu līnija HNO258 ir iegūta no mutes dobuma plakanšūnu karcinomas, kas ir galvas un kakla plakanšūnu karcinomas (HNSCC) apakštips. Šī šūnu līnija ...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HNO258 šūnu līnija ir iegūta no mutes dobuma plakanšūnu karcinomas, kas ir galvas un kakla plakanšūnu karcinomas (HNSCC) apakštips. Šai šūnu līnijai ir vairākas hromosomu anomālijas, kas ir identificētas, izmantojot hromosomu salīdzinošo genomu hibridizāciju (cCGH). Konkrēti, HNO258 ir konstatēts DNS kopiju skaita pieaugums hromosomu apgabalos 1q41, 3q21-qter, 7p, 7cen-q21, 8q22-qter, 9cen-p13, 9q31-qter, 11q13, 15p un 15q. Turklāt tai ir kopiju skaita zudumi 4p un 18q12-qter reģionos. Šīs ģenētiskās izmaiņas ir bieži sastopamas HNSCC, un tās ir saistītas ar audzēja rašanos un vēža progresēšanu.

HNO258 novērotā 11q13 amplifikācija ir īpaši ievērības cienīga, jo tā ir saistīta ar tādu onkogēnu kā CCND1 (ciklīna D1) un CTTN (kortaktīna), kas ir iesaistīti attiecīgi šūnu cikla regulācijā un citoskeleta organizācijā, pārmērīgu ekspresiju. Šie onkogēni bieži ir saistīti ar vēža šūnu agresīvu uzvedību, veicinot palielinātu proliferāciju un invazivitāti. HNO258 detalizētā ģenētiskā raksturojuma dēļ tā ir vērtīgs modelis mutes dobuma plakanšūnu karcinomas pamatā esošo molekulāro mehānismu izpētei un potenciālo terapeitisko stratēģiju novērtēšanai, kas vērstas pret šīm specifiskajām ģenētiskajām izmaiņām.

Audums
Mutes dobums
Slimība
Galvas un kakla plakanšūnu karcinoma (HNSCC)

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
HNO258 (Cytion kataloga numurs 300146)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_D221

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
62 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis