Células HNO258

A linhagem celular HNO258 é derivada de um carcinoma espinocelular oral, que é um subtipo do carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (HNSCC). Essa linhagem celular apresenta várias anomalias cromossômicas, que foram identificadas por meio da hibridização genômica comparativa cromossômica (cCGH). Especificamente, a HNO258 apresentou ganhos no número de cópias de DNA nas regiões cromossômicas 1q41, 3q21-qter, 7p, 7cen-q21, 8q22-qter, 9cen-p13, 9q31-qter, 11q13, 15p e 15q. Além disso, apresenta perdas no número de cópias nas regiões 4p e 18q12-qter. Essas alterações genéticas são comuns no HNSCC e estão associadas à tumorigênese e à progressão do câncer.

A amplificação de 11q13, observada no HNO258, é particularmente digna de nota devido à sua associação com a superexpressão de oncogenes como CCND1 (ciclina D1) e CTTN (cortactina), que estão envolvidos na regulação do ciclo celular e na organização do citoesqueleto, respectivamente. Esses oncogenes estão frequentemente implicados no comportamento agressivo das células cancerosas, contribuindo para o aumento da proliferação e da invasividade. A caracterização genética detalhada do HNO258 torna-o um modelo valioso para o estudo dos mecanismos moleculares subjacentes ao carcinoma espinocelular oral e para a avaliação de possíveis estratégias terapêuticas que tenham como alvo essas alterações genéticas específicas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.