Ga naar de inhoud
HNO258 Cellen
Weefsel
Mondholte
Ziekte
Hoofd-hals plaveiselcelcarcinoom (HNSCC)

Documenten

HNO258 Cellen

Cell line · Productnummer 300146

De HNO258-cellijn is afkomstig van een plaveiselcelcarcinoom in de mond, een subtype van het plaveiselcelcarcinoom van het hoofd en de nek (HNSCC). Deze cellijn ...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HNO258 cellijn is afgeleid van een oraal plaveiselcelcarcinoom, een subtype van hoofd-hals plaveiselcelcarcinoom (HNSCC). Deze cellijn vertoont verschillende chromosomale afwijkingen, die zijn geïdentificeerd door middel van chromosomale vergelijkende genomische hybridisatie (cCGH). Specifiek heeft HNO258 een toename van het DNA-kopiegetal laten zien in de chromosomale regio's 1q41, 3q21-qter, 7p, 7cen-q21, 8q22-qter, 9cen-p13, 9q31-qter, 11q13, 15p en 15q. Daarnaast is er sprake van kopiegetalverlies in de regio's 4p en 18q12-qter. Deze genetische veranderingen komen veel voor in HNSCC en worden in verband gebracht met tumorigenese en kankerprogressie.

De amplificatie van 11q13, waargenomen in HNO258, is met name opmerkelijk vanwege de associatie met de overexpressie van oncogenen zoals CCND1 (cycline D1) en CTTN (cortactine), die betrokken zijn bij respectievelijk celcyclusregulatie en cytoskeletorganisatie. Deze oncogenen zijn vaak betrokken bij het agressieve gedrag van kankercellen en dragen bij aan een verhoogde proliferatie en invasiviteit. De gedetailleerde genetische karakterisering van HNO258 maakt het een waardevol model voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan oraal plaveiselcelcarcinoom en voor het evalueren van potentiële therapeutische strategieën die gericht zijn op deze specifieke genetische veranderingen.

Weefsel
Mondholte
Ziekte
Hoofd-hals plaveiselcelcarcinoom (HNSCC)

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HNO258 (Cytion catalogusnummer 300146)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_D221

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
62 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch