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Cellule HNO258
Tessuto
Cavità orale
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC)

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Cellule HNO258

Cell line · Codice prodotto 300146

La linea cellulare HNO258 deriva da un carcinoma a cellule squamose orale, che è un sottotipo del carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Questa linea cellulare ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HNO258 deriva da un carcinoma orale a cellule squamose, che è un sottotipo di carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Questa linea cellulare presenta diverse anomalie cromosomiche, identificate mediante ibridazione genomica comparativa (cCGH). In particolare, HNO258 ha mostrato aumenti del numero di copie di DNA nelle regioni cromosomiche 1q41, 3q21-qter, 7p, 7cen-q21, 8q22-qter, 9cen-p13, 9q31-qter, 11q13, 15p e 15q. Inoltre, presenta perdite di numero di copie nelle regioni 4p e 18q12-qter. Queste alterazioni genetiche sono comuni negli HNSCC e sono associate alla tumorigenesi e alla progressione del cancro.

L'amplificazione di 11q13, osservata in HNO258, è particolarmente degna di nota per la sua associazione con la sovraespressione di oncogeni come CCND1 (ciclina D1) e CTTN (cortactina), coinvolti rispettivamente nella regolazione del ciclo cellulare e nell'organizzazione citoscheletrica. Questi oncogeni sono spesso implicati nel comportamento aggressivo delle cellule tumorali, contribuendo ad aumentarne la proliferazione e l'invasività. La dettagliata caratterizzazione genetica di HNO258 lo rende un modello prezioso per lo studio dei meccanismi molecolari alla base del carcinoma orale a cellule squamose e per la valutazione di potenziali strategie terapeutiche mirate a queste specifiche alterazioni genetiche.

Tessuto
Cavità orale
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC)

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HNO258 (numero di catalogo Cytion 300146)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D221

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Caucasico