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MOLT-3-Zellen
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Akute lymphoblastische Leukämie (ALL)
Synonyme
Molt-3, MOLT 3, Molt 3, MOLT3, Molt3

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MOLT-3-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300116

MOLT-3 ist eine humane T-Lymphoblasten-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines 19-jährigen männlichen Patienten mit akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) gewonnen wurde, genauer gesagt...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MOLT-3 ist eine humane T-Lymphoblasten-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines 19-jährigen männlichen Patienten mit akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) gewonnen wurde, und zwar während eines Rückfalls nach einer früheren Chemotherapie. Diese Zelllinie wurde von Dr. J. Minowada hinterlegt und ist eng mit der Zelllinie MOLT-4 verwandt, die beide von demselben Patienten stammen. MOLT-3-Zellen werden häufig in der Forschung zu Erkrankungen des Immunsystems, der Immunologie und der Immunonkologie verwendet und sind daher ein wichtiges Modell für die Untersuchung von T-Zell-Leukämie und der Immunantwort auf verschiedene Behandlungen.

Als Suspensionszelllinie weist MOLT-3 typische T-Zell-Marker auf, darunter eine hohe Expression von CD5 (97 %) und CD7 (97 %) zusammen mit CD1 und CD4. Diese Zelllinie zeichnet sich auch durch eine erhöhte Aktivität der terminalen Desoxynukleotidyltransferase (TdT) aus, die üblicherweise mit unreifen lymphoiden Zellen assoziiert wird. MOLT-3 ist wertvoll für die Untersuchung der T-Zell-Differenzierung, der Rezeptor-Signalübertragung und der Apoptose, insbesondere im Zusammenhang mit der akuten lymphoblastischen T-Zell-Leukämie (T-ALL). Aufgrund ihrer Wachstumseigenschaften und ihrer gut charakterisierten Antigenexpression werden sie häufig für das Wirkstoffscreening und die therapeutische Forschung zur Leukämiebehandlung eingesetzt.

Darüber hinaus produzieren MOLT-3-Zellen keine Immunglobuline und enthalten keine nachweisbaren Epstein-Barr-Viren (EBV), was sie zu einem ausgezeichneten Modell für die Untersuchung von T-Zell-spezifischen Signalwegen ohne Beeinträchtigung durch B-Zell-Eigenschaften macht. Die Reaktion der Zelllinie auf verschiedene experimentelle Manipulationen verbessert ihre Anwendung in der Immuno-Onkologie, insbesondere für die Erforschung potenzieller therapeutischer Interventionen bei bösartigen T-Zell-Erkrankungen.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Akute lymphoblastische Leukämie (ALL)
Synonyme
  • Molt-3
  • MOLT 3
  • Molt 3
  • MOLT3
  • Molt3

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
T-Lymphozyt
Karyotyp
Hypertetraploid
Verdopplungszeit
24 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MOLT-3 (Cytion Katalognummer 300116)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0624

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
CD1(+), CD5(+), CD7(+), CD11a(+) (Greenberg et al. 1988).

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit hitzeinaktiviertem 10%igem FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Aussaatdichte
0,5 bis 1 x 105 Zellen/ml
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
19 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch