Pāriet uz saturu
MOLT-3 šūnas
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta limfoblastiskā leikēmija (ALL)
Sinonīmi
Molt-3, MOLT 3, Molt 3, MOLT3, Molt3

Dokumenti

MOLT-3 šūnas

Cell line · Preces numurs 300116

MOLT-3 ir cilvēka T-limfoblastu šūnu līnija, kas iegūta no 19 gadus veca vīrieša, kurš slimoja ar akūtu limfoblastisko leikēmiju (ALL), perifērās asins...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MOLT-3 ir cilvēka T limfoblastu šūnu līnija, kas iegūta no perifērajām asinīm 19 gadus vecam vīrietim, kurš slimoja ar akūtu limfoblastisko leikēmiju (ALL), īpaši recidīva laikā pēc iepriekšējas ķīmijterapijas. Šo šūnu līniju deponēja Dr. J. Minowada, un tā ir cieši saistīta ar MOLT-4 šūnu līniju, abas iegūtas no tā paša pacienta. MOLT-3 šūnas tiek plaši izmantotas imūnsistēmas traucējumu, imunoloģijas un imūnonkoloģijas pētījumos, padarot tās par svarīgu modeli T šūnu leikēmijas un imūnās atbildes reakcijas uz dažādiem ārstēšanas veidiem izpētei.

Kā suspensijas šūnu līnija MOLT-3 uzrāda tipiskus T šūnu marķierus, tostarp augstu CD5 (97 %) un CD7 (97 %), kā arī CD1 un CD4 ekspresiju. Šai šūnu līnijai raksturīga arī paaugstināta termināldeoksinukleotīdtransferāzes (TdT) aktivitāte, kas parasti ir saistīta ar nenobriedušām limfoīdām šūnām. MOLT-3 ir vērtīga T-šūnu diferenciācijas, receptoru signalizācijas un apoptozes izpētei, īpaši saistībā ar T-šūnu akūtu limfoblastisko leikēmiju (T-ALL). Tā augšanas īpašību un labi raksturotās antigēna ekspresijas dēļ to bieži izmanto zāļu skrīninga un terapeitiskajos pētījumos leikēmijas ārstēšanai.

Turklāt MOLT-3 šūnas neražo imūnglobulīnus un nesatur nosakāmu Epšteina-Barra vīrusu (EBV), kas padara tās par lielisku modeli T šūnām specifisku ceļu izpētei bez B šūnu īpašību iejaukšanās. Šūnu līnijas reakcija uz dažādām eksperimentālām manipulācijām vēl vairāk uzlabo tās pielietojumu imūnonkoloģijā, jo īpaši, lai izpētītu iespējamās terapeitiskās iejaukšanās, kas vērstas pret T šūnu ļaundabīgajiem audzējiem.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta limfoblastiskā leikēmija (ALL)
Sinonīmi
  • Molt-3
  • MOLT 3
  • Molt 3
  • MOLT3
  • Molt3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
T limfocīts
Kariotips
Hipertetraploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MOLT-3 (Cytion kataloga numurs 300116)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0624

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CD1(+), CD5(+), CD7(+), CD11a(+) (Greenberg et al. 1988).

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar termiski inaktivētu 10% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
0,5 līdz 1 x 105 šūnas/ml
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
19 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis