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Cellule MOLT-3
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta (ALL)
Sinonimi
Molt-3, MOLT 3, Molt 3, MOLT3, Molt3

Documenti

Cellule MOLT-3

Cell line · Codice prodotto 300116

MOLT-3 è una linea cellulare di linfoblasti T umani derivata dal sangue periferico di un paziente di sesso maschile di 19 anni affetto da leucemia linfoblastica acuta (LLA), in particolare...

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01Informazioni generali

Descrizione

MOLT-3 è una linea cellulare di linfoblasto T umano derivata dal sangue periferico di un paziente maschio di 19 anni affetto da leucemia linfoblastica acuta (ALL), in particolare durante una ricaduta dopo una precedente chemioterapia. Questa linea cellulare è stata depositata dal Dr. J. Minowada ed è strettamente correlata alla linea cellulare MOLT-4, entrambe provenienti dallo stesso paziente. Le cellule MOLT-3 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sui disturbi del sistema immunitario, l'immunologia e l'immuno-oncologia, e rappresentano un modello importante per lo studio della leucemia a cellule T e della risposta immunitaria ai vari trattamenti.

Come linea cellulare in sospensione, MOLT-3 presenta i tipici marcatori delle cellule T, tra cui un'elevata espressione di CD5 (97%) e CD7 (97%), oltre a CD1 e CD4. Questa linea cellulare è inoltre caratterizzata da un'elevata attività della deossinucleotidil transferasi terminale (TdT), comunemente associata alle cellule linfoidi immature. La MOLT-3 è preziosa per lo studio del differenziamento delle cellule T, della segnalazione dei recettori e dell'apoptosi, soprattutto nel contesto della leucemia linfoblastica acuta a cellule T (T-ALL). Grazie alle sue proprietà di crescita e all'espressione ben caratterizzata dell'antigene, viene spesso utilizzata nello screening dei farmaci e nella ricerca terapeutica per i trattamenti della leucemia.

Inoltre, le cellule MOLT-3 non producono immunoglobuline né contengono virus di Epstein-Barr (EBV) rilevabili, il che le rende un modello eccellente per lo studio dei percorsi specifici delle cellule T senza interferenze da parte delle caratteristiche delle cellule B. La risposta della linea cellulare a varie manipolazioni sperimentali ne migliora ulteriormente l'applicazione in immuno-oncologia, in particolare per l'esplorazione di potenziali interventi terapeutici mirati alle neoplasie a cellule T.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta (ALL)
Sinonimi
  • Molt-3
  • MOLT 3
  • Molt 3
  • MOLT3
  • Molt3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfocita T
Cariotipo
Ipertetraploide
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MOLT-3 (numero di catalogo Cytion 300116)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0624

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD1(+), CD5(+), CD7(+), CD11a(+) (Greenberg et al. 1988).

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
Da 0,5 a 1 x 105 cellule/ml
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
19 anni
Etnia
Caucasico