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Células MOLT-3
Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia linfoblástica aguda (LLA)
Sinónimos
Molt-3, MOLT 3, Molt 3, MOLT3, Molt3

Documentos

Células MOLT-3

Cell line · Número do produto 300116

A MOLT-3 é uma linha celular de linfoblastos T humanos derivada do sangue periférico de um doente do sexo masculino, de 19 anos, com leucemia linfoblástica aguda (LLA), especificamente...

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01Informações gerais

Descrição

A MOLT-3 é uma linha celular de linfoblastos T humanos derivada do sangue periférico de um doente do sexo masculino de 19 anos com leucemia linfoblástica aguda (LLA), especificamente durante uma recaída após quimioterapia prévia. Esta linha de células foi depositada pelo Dr. J. Minowada e está estreitamente relacionada com a linha de células MOLT-4, ambas provenientes do mesmo doente. As células MOLT-3 são amplamente utilizadas na investigação sobre doenças do sistema imunitário, imunologia e imuno-oncologia, tornando-se um modelo importante para o estudo da leucemia de células T e da resposta imunitária a vários tratamentos.

Como uma linha de células em suspensão, a MOLT-3 exibe marcadores típicos de células T, incluindo uma elevada expressão de CD5 (97%) e CD7 (97%), juntamente com CD1 e CD4. Esta linha celular também se caracteriza por uma atividade elevada da desoxinucleotidil transferase terminal (TdT), que está normalmente associada a células linfóides imaturas. A MOLT-3 é valiosa para estudar a diferenciação das células T, a sinalização dos receptores e a apoptose, especialmente no contexto da leucemia linfoblástica aguda de células T (LLA-T). Devido às suas propriedades de crescimento e à expressão bem caracterizada de antigénios, é frequentemente utilizada no rastreio de medicamentos e na investigação terapêutica para tratamentos da leucemia.

Além disso, as células MOLT-3 não produzem imunoglobulinas nem contêm o vírus Epstein-Barr (EBV) detetável, o que as torna um excelente modelo para estudar as vias específicas das células T sem a interferência das caraterísticas das células B. A resposta da linha celular a várias manipulações experimentais aumenta ainda mais a sua aplicação em imuno-oncologia, particularmente para explorar potenciais intervenções terapêuticas dirigidas a doenças malignas de células T.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia linfoblástica aguda (LLA)
Sinónimos
  • Molt-3
  • MOLT 3
  • Molt 3
  • MOLT3
  • Molt3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas
Tipo de célula
Linfócito T
Cariótipo
Hipertetraplóide
Tempo de duplicação
24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
MOLT-3 (número de catálogo Cytion 300116)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0624

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
CD1(+), CD5(+), CD7(+), CD11a(+) (Greenberg et al. 1988).

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS ativado pelo calor
Subcultura
Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
Densidade de sementeira
0,5 a 1 x 105 células/ml
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
19 anos
Etnia
Caucasiano