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Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom bei Erwachsenen
Synonyme
SNU398, NCI-SNU-398

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SNU-398

Cell line · Artikelnummer 305274

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie SNU-398 stammt von einem hepatozellulären Karzinom (HCC) eines erwachsenen Menschen. Diese Zelllinie wird in der Leberkrebsforschung ausgiebig verwendet, um die molekularen Mechanismen der Hepatokarzinogenese, das Fortschreiten des Tumors und die Entwicklung von therapeutischen Strategien zu untersuchen. Das hepatozelluläre Karzinom ist eine weit verbreitete und tödliche Form von Leberkrebs, und SNU-398-Zellen sind ein wichtiges Modell für die Untersuchung der genetischen und epigenetischen Veränderungen, die mit dieser Krankheit einhergehen.

SNU-398-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und exprimieren Marker, die für Leberkrebs charakteristisch sind, wie z. B. Alpha-Fetoprotein (AFP) und Zytokeratine. Sie weisen genetische Mutationen und Veränderungen auf, die für HCC typisch sind, darunter Mutationen im TP53-Gen, das mit vielen Krebsarten in Verbindung gebracht wird. Forscher nutzen SNU-398-Zellen, um verschiedene Signalwege zu erforschen, die bei Leberkrebs eine Rolle spielen, wie z. B. die Wnt/β-Catenin-, PI3K/Akt- und MAPK-Wege. Diese Zellen werden auch in Wirkstoff-Screening-Assays eingesetzt, um die Wirksamkeit von Chemotherapeutika und zielgerichteten Therapien zu bewerten, sowie in Studien zur Untersuchung von Resistenzmechanismen gegenüber herkömmlichen Behandlungen. Die Bedeutung der SNU-398-Zelllinie für die Erforschung des hepatozellulären Karzinoms liegt in ihrer Fähigkeit, die Biologie des Leberkrebses zu modellieren und zur Entwicklung wirksamerer Therapien für Leberkrebspatienten beizutragen.

Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom bei Erwachsenen
Synonyme
  • SNU398
  • NCI-SNU-398

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
SNU-398 (Cytion-Katalognummer 305274)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0077

05Expression und Anfälligkeit

Oberflächenantigene
Blutgruppe 0, Rh +
Mutationsprofil
Mutation: CTNNB1, p.Ser37Cys (c.110C>G), heterozygot; Mutation: TP53, p.Ser215Ile (c.644G>T), heterozygot
Viren
Transformant: Hepatitis-B-Virus (HBV)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % hitzeinaktiviertem FBS, 25 mM HEPES
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
42 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Koreanisch