Pāriet uz saturu
Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
SNU398, NCI-SNU-398

Dokumenti

SNU-398

Cell line · Preces numurs 305274

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SNU-398 šūnu līnija ir iegūta no pieauguša cilvēka hepatocelulārās karcinomas (HCC). Šo šūnu līniju plaši izmanto aknu vēža pētījumos, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir hepatokarcinogēzes pamatā, audzēja progresēšanu un terapeitisko stratēģiju izstrādi. Hepatocelulārā karcinoma ir izplatīta un nāvējoša aknu vēža forma, un SNU-398 šūnas ir piemērots modelis ar šo slimību saistīto ģenētisko un epigenētisko izmaiņu izpētei.

SNU-398 šūnām piemīt epitēlija morfoloģija un tās ekspresē aknu vēzim raksturīgus marķierus, piemēram, alfa-fetoproteīnu (AFP) un citokeratīnus. Tajās ir HCC raksturīgas ģenētiskās mutācijas un izmaiņas, tostarp mutācijas TP53 gēnā, kas parasti ir saistīts ar daudziem vēža veidiem. Pētnieki izmanto SNU-398 šūnas, lai izpētītu dažādus signālu ceļus, kas saistīti ar aknu vēzi, piemēram, Wnt/β-katerīna, PI3K/Akt un MAPK ceļus. Šīs šūnas izmanto arī zāļu skrīninga testos, lai novērtētu ķīmijterapeitisko līdzekļu un mērķterapijas efektivitāti, kā arī pētījumos, kuros pēta rezistences mehānismus pret parasto ārstēšanu. SNU-398 šūnu līnijas nozīme hepatocelulārās karcinomas pētniecībā ir tās spēja modelēt aknu vēža bioloģiju un veicināt efektīvākas terapijas izstrādi aknu vēža pacientiem.

Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • SNU398
  • NCI-SNU-398

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
SNU-398 (Cytion kataloga numurs 305274)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0077

05Pazīmes un uzņēmība

Virsmas antigēni
Asins tips 0, Rh +
Mutāciju profils
Mutācija: Ser37Cys (c.110C>G), heterozigotiska; mutācija: CTNNB1, p.Ser37Cys (c.110C>G); mutācija: TP53, p.Ser215Ile (c.644G>T), heterozigotiska
Vīrusi
Transformants: B hepatīta vīruss (HBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS, 25 mM HEPES
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
42 gadi
Etniskā piederība
Korejas