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A875
Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Synonyme
A-875

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A875

Cell line · Artikelnummer 305099

The A875 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in a 40-year-old female. Exhibiting morphological and growth characteristi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie A875 ist eine humane Melanom-Zelllinie, die aus einem metastatischen Herd einer 40-jährigen Frau stammt. A875 weist morphologische und wachstumsbedingte Merkmale auf, die typisch für das maligne Melanom sind, und wurde in der onkologischen Forschung ausgiebig verwendet, wobei der Schwerpunkt auf der Biologie des Melanoms, den Mechanismen der Metastasierung und der Therapieresistenz lag. Diese Zelllinie zeichnet sich durch ihr aggressives Wachstum und Metastasierungspotenzial aus, was sie zu einem ausgezeichneten Modell für In-vivo-Tumorwachstums- und Metastasierungsstudien in Xenotransplantationen macht.

A875-Zellen sind besonders wertvoll für die Erforschung der molekularen und genetischen Grundlagen der Melanomprogression. Die Forschung mit dieser Zelllinie umfasst Studien zur Rolle von Onkogenen, Tumorsuppressorgenen und verschiedenen Signalwegen, die bei der Krebsentwicklung und -progression von zentraler Bedeutung sind. Die Zelllinie wurde zur Bewertung neuartiger Chemotherapeutika und zielgerichteter Therapien eingesetzt und profitiert von ihren genetischen Veränderungen, die denen in menschlichen Melanomen ähneln. Darüber hinaus dient A875 aufgrund seiner Fähigkeit, starke Immunreaktionen auszulösen, als Schlüsselmodell für die Bewertung der Mechanismen der Immunantwort auf das Melanom und hilft so bei der Entwicklung und Prüfung neuer Immuntherapien.

Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Synonyme
  • A-875

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Polygonal

04Bezeichner

Quellenangabe
A875 (Cytion-Katalognummer 305099)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_4733

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
40 Jahre