Siirry sisältöön
A875
Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Synonyymit
A-875

Asiakirjat

A875

Cell line · Tuotenumero 305099

The A875 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in a 40-year-old female. Exhibiting morphological and growth characteristi...

€500.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A875-solulinja on ihmisen melanoomasolulinja, joka on peräisin 40-vuotiaan naisen etäpesäkkeestä. A875:llä on pahanlaatuiselle melanoomalle tyypilliset morfologiset ja kasvuun liittyvät ominaisuudet, ja sitä on hyödynnetty laajalti onkologisessa tutkimuksessa, jossa on keskitytty erityisesti melanooman biologiaan, etäpesäkemekanismeihin ja terapeuttiseen resistenssiin. Tälle solulinjalle on ominaista aggressiivinen kasvu ja metastaasipotentiaali, mikä tekee siitä erinomaisen mallin kasvaimen kasvun ja etäpesäkkeiden tutkimiseen in vivo ksenograft-tutkimuksissa.

A875-solut ovat erityisen arvokkaita melanooman etenemisen molekulaaristen ja geneettisten taustatekijöiden tutkimisessa. Tätä solulinjaa hyödyntävässä tutkimuksessa tutkitaan onkogeenien, kasvainsuppressorigeenien ja erilaisten signaalireittien roolia, jotka ovat keskeisiä syövän kehityksessä ja etenemisessä. Solulinjaa on käytetty uusien kemoterapeuttisten aineiden ja kohdennettujen hoitojen arvioinnissa, ja se hyötyy sen geneettisistä muutoksista, jotka jäljittelevät ihmisen melanoomissa esiintyviä muutoksia. Lisäksi A875 toimii keskeisenä mallina melanooman immuunivasteen mekanismien arvioinnissa, koska se kykenee saamaan aikaan voimakkaita immuunireaktioita, mikä auttaa uusien immunoterapioiden kehittämisessä ja testaamisessa.

Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Synonyymit
  • A-875

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Polygonal

04Tunnisteet

Lähdeviite
A875 (Cytionin luettelonumero 305099)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_4733

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
40 vuotta