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A875
Tecido
Pele
Doença
Melanoma
Sinónimos
A-875

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A875

Cell line · Número do produto 305099

The A875 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in a 40-year-old female. Exhibiting morphological and growth characteristi...

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular A875 é uma linha celular de melanoma humano derivada de um local metastático de uma mulher de 40 anos. Apresentando caraterísticas morfológicas e de crescimento típicas do melanoma maligno, a linha A875 tem sido amplamente utilizada na investigação oncológica, com especial incidência na biologia do melanoma, nos mecanismos de metástase e na resistência terapêutica. Esta linha celular caracteriza-se pelo seu crescimento agressivo e potencial metastático, o que a torna um excelente modelo para estudos de crescimento tumoral in vivo e de metástases em contextos de xenoenxertos.

As células A875 são particularmente valiosas para a investigação dos fundamentos moleculares e genéticos da progressão do melanoma. A investigação que envolve esta linha celular inclui estudos sobre os papéis dos oncogenes, genes supressores de tumores e várias vias de sinalização que são fundamentais no desenvolvimento e progressão do cancro. A linha celular tem sido utilizada na avaliação de novos agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas, beneficiando das suas alterações genéticas que imitam as encontradas nos melanomas humanos. Além disso, a A875 serve de modelo-chave para avaliar os mecanismos de resposta imunitária ao melanoma, devido à sua capacidade de provocar fortes reacções imunitárias, ajudando assim no desenvolvimento e teste de novas imunoterapias.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma
Sinónimos
  • A-875

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Poligonal

04Identificadores

Referência
A875 (número de catálogo Cytion 305099)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4733

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
40 anos