Pāriet uz saturu
A875
Audums
Āda
Slimība
Melanoma
Sinonīmi
A-875

Dokumenti

A875

Cell line · Preces numurs 305099

The A875 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in a 40-year-old female. Exhibiting morphological and growth characteristi...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

A875 šūnu līnija ir cilvēka melanomas šūnu līnija, kas iegūta no 40 gadus vecas sievietes metastāzes vietas. Tā kā A875 līnijai piemīt ļaundabīgai melanomai raksturīgas morfoloģiskās un augšanas īpašības, tā ir plaši izmantota onkoloģiskajos pētījumos, īpaši pievēršot uzmanību melanomas bioloģijai, metastāžu veidošanās mehānismiem un rezistencei pret terapiju. Šai šūnu līnijai ir raksturīga agresīva augšana un metastāžu potenciāls, tāpēc tā ir lielisks modelis audzēja augšanas un metastāžu pētījumiem in vivo ksenogrāfta apstākļos.

A875 šūnas ir īpaši vērtīgas melanomas progresēšanas molekulāro un ģenētisko pamatu izpētei. Pētījumi, kuros izmanto šo šūnu līniju, ietver pētījumus par onkogēnu, audzēju nomācošo gēnu un dažādu vēža attīstībā un progresēšanā būtisku signālceļu lomu. Šūnu līnija ir izmantota jaunu ķīmijterapeitisko līdzekļu un mērķterapiju novērtēšanā, izmantojot tās ģenētiskās izmaiņas, kas imitē cilvēka melanomās konstatētās izmaiņas. Turklāt A875 kalpo kā galvenais modelis, lai novērtētu imūnās atbildes reakcijas mehānismus uz melanomu, jo tā spēj izraisīt spēcīgas imūnreakcijas, tādējādi palīdzot izstrādāt un testēt jaunas imūnterapijas.

Audums
Āda
Slimība
Melanoma
Sinonīmi
  • A-875

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Daudzstūris

04Identifikatori

Atsauce
A875 (Cytion kataloga numurs 305099)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4733

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
40 gadi