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BFTC-905
Gewebe
Harnblase
Krankheit
Harnblasenkarzinom
Synonyme
BFTC 905, BFTC905, Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

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BFTC-905

Cell line · Artikelnummer 305749

The BFTC-905 cell line is a human transitional cell carcinoma (TCC) model derived from a high-grade, papillary bladder tumor in a female patient. It was e...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie BFTC-905 ist ein Modell für das humane Übergangszellkarzinom (TCC), das aus einem hochgradigen papillären Blasentumor einer Patientin gewonnen wurde. Sie wurde etabliert, um aggressiven Blasenkrebs zu repräsentieren, und wurde in zytogenetischen und molekularen Profiling-Studien eingesetzt, um die Biologie von Blasentumoren und therapeutische Anfälligkeiten zu verstehen. BFTC-905 weist einen hochkomplexen und umgelagerten Karyotyp auf, der mehrere für fortgeschrittene Blasenkarzinome typische chromosomale Anomalien umfasst. Dazu gehören nicht-zufällige Veränderungen wie Deletionen von 8p, Duplikationen von 8q und Chromosomengewinne auf den Chromosomen 7 und 20 – Merkmale, die häufig mit dem Fortschreiten der Erkrankung und einer schlechten Prognose bei Urothelkarzinomen in Verbindung gebracht werden.

Eine umfassende Charakterisierung mittels mehrfarbiger Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (M-FISH) hat zahlreiche strukturelle Umlagerungen in BFTC-905 aufgezeigt, darunter interchromosomale Translokationen und Deletionen, die Loci betreffen, die potenziell für den Verlust von Tumorsuppressorgenen relevant sind. Insbesondere weist BFTC-905 eine Deletion von Chromosom 8p21 auf, einer Region, die bei aggressivem TCC häufig verloren geht und mit Tumorsuppressorgenen assoziiert ist. Diese zytogenetische Komplexität bietet eine wertvolle Gelegenheit, die Genfunktion im Kontext genomischer Instabilität zu untersuchen, einem Kennzeichen von Blasenkrebs im Spätstadium.

BFTC-905 wurde zudem in groß angelegte pharmakogenomische Studien wie die Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) und Genomics of Drug Sensitivity in Cancer (GDSC) aufgenommen. Diese Ressourcen haben die molekulare Übereinstimmung von BFTC-905 mit primären Blasentumoren bestätigt und dessen Einsatz in prädiktiven Modellen zur Vorhersage des Ansprechens auf Krebsmedikamente ermöglicht. Sein Multi-Omics-Profil – einschließlich Genexpression, Mutationsstatus, Kopienzahlvariation und DNA-Methylierung – macht es zu einem leistungsstarken Modell für die Untersuchung von blasenkrebsspezifischen therapeutischen Zielen und Resistenzmechanismen.

Gewebe
Harnblase
Krankheit
Harnblasenkarzinom
Synonyme
  • BFTC 905
  • BFTC905
  • Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Zelltyp
Epithelial
Verdopplungszeit
60–70 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
BFTC-905 (Cytion-Katalognummer 305749)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1083

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
G6PD; MD; LD
Mutationsprofil
Mutation: NRAS, einfach, p.Gln61Leu (c.182A>T), heterozygot (Cosmic-CLP=910926), TP53, einfach, c.673-2A>T (IVS6-2A>T), homozygot, Anmerkung=Splice-Akzeptor-Mutation (Cosmic-CLP=910926)
Viren
Reverse-Transkriptase-negativ; PCR: EBV-, HBV-, HCV-, HHV-8-, HIV-1-, HIV-2-, HTLV-1/2-, MLV-, SMRV-

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
51 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Chinesisch