Pāriet uz saturu
BFTC-905
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
BFTC 905, BFTC905, Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

Dokumenti

BFTC-905

Cell line · Preces numurs 305749

The BFTC-905 cell line is a human transitional cell carcinoma (TCC) model derived from a high-grade, papillary bladder tumor in a female patient. It was e...

€700.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BFTC-905 šūnu līnija ir cilvēka pārejas šūnu karcinomas (TCC) modelis, kas iegūts no augstas pakāpes papilārā urīnpūšļa audzēja sievietei. Tā tika izveidota, lai atspoguļotu agresīvu urīnpūšļa vēzi, un ir izmantota citogenētiskos un molekulāros profilēšanas pētījumos, lai izprastu urīnpūšļa audzēja bioloģiju un terapeitiskās vājās vietas. BFTC-905 uzrāda ļoti sarežģītu un pārkārtotu kariotipu, kas ietver vairākas hromosomu anomālijas, kas raksturīgas progresējušam urīnpūšļa vēzim. Tās ietver neizlases izmaiņas, piemēram, 8p delecijas, 8q duplikācijas un hromosomu 7 un 20 pieaugumus, kas bieži saistīti ar slimības progresēšanu un sliktu prognozi urotheliālajā karcinomā.

Plaša raksturošana, izmantojot daudzkrāsu fluorescences in situ hibridizāciju (M-FISH), ir atklājusi daudzas strukturālas pārkārtošanās BFTC-905, tostarp starphromosomu translokācijas un delecijas, kas ietekmē lokusus ar potenciālu saistību ar audzēja supresoru zudumu. Konkrēti, BFTC-905 uzrāda 8p21 hromosomas deleciju, reģionu, kas bieži tiek zaudēts agresīvā TCC un ir saistīts ar audzēja supresoru gēniem. Šī citogenētiskā sarežģītība sniedz vērtīgu iespēju analizēt gēnu funkcijas genomiskās nestabilitātes kontekstā, kas ir vēlīnā stadijā esoša urīnpūšļa vēža pazīme.

BFTC-905 ir iekļauts arī liela mēroga farmakogenomikas pētījumos, piemēram, Vēža šūnu līniju enciklopēdijā (CCLE) un Vēža zāļu jutības genomikā (GDSC). Šie resursi ir apstiprinājuši BFTC-905 molekulāro atbilstību primārajiem urīnpūšļa audzējiem un ļāvuši to izmantot pretvēža zāļu reakcijas prognozēšanas modelēšanā. Tā daudzveidīgais omikas profils, kas ietver gēnu ekspresiju, mutāciju statusu, kopiju skaita variācijas un DNS metilāciju, padara to par spēcīgu modeli urīnpūšļa vēzim specifisku terapeitisko mērķu un rezistences mehānismu izpētei.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
  • BFTC 905
  • BFTC905
  • Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Šūnu tips
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
60–70 stundas

04Identifikatori

Atsauce
BFTC-905 (Cytion kataloga numurs 305749)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1083

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
G6PD; MD; LD
Mutāciju profils
Mutācija: NRAS, vienkārša, p.Gln61Leu (c.182A>T), heterozigota (Cosmic-CLP=910926), TP53, vienkārša, c.673-2A>T (IVS6-2A>T), homozigota, piezīme = splaisinga akceptora mutācija (Cosmic-CLP=910926)
Vīrusi
Negatīvs rezultāts reversās transkriptāzes testā; PCR: EBV –, HBV –, HCV –, HHV-8 –, HIV-1 –, HIV-2 –, HTLV-1/2 –, MLV –, SMRV –

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
51 gads
Etniskā piederība
Ķīniešu