Mine otse sisu juurde
BFTC-905
Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
BFTC 905, BFTC905, Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

Dokumendid

BFTC-905

Cell line · Toote number 305749

The BFTC-905 cell line is a human transitional cell carcinoma (TCC) model derived from a high-grade, papillary bladder tumor in a female patient. It was e...

€700.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin BFTC-905 on inimese üleminekurakk-kartsinoomi (TCC) mudel, mis on saadud naispatsiendi kõrge astme papillaarse põievähi koest. See loodi agressiivse põievähi modelleerimiseks ning seda on kasutatud tsütogeneetilistes ja molekulaarsetes profiiliuuringutes, et mõista põievähi bioloogiat ja ravile reageerimise nõrkusi. BFTC-905-l on väga keeruline ja ümberkorraldatud kariotüüp, mis sisaldab mitmeid kromosoomianomaaliaid, mis on tüüpilised kaugelearenenud põievähi puhul. Nende hulka kuuluvad mittesuhtevad muutused, nagu 8p deleetsioonid, 8q duplikatsioonid ning kromosoomide 7 ja 20 lisandumised, mis on omadused, mis on sageli seotud urotsellulaarse kartsinoomi haiguse progresseerumise ja halva prognoosiga.

Põhjalik iseloomustamine mitmevärvilise fluoresents-in-situ-hübridisatsiooni (M-FISH) abil on paljastanud BFTC-905-s arvukad struktuurilised ümberkorraldused, sealhulgas kromosoomidevahelised translokatsioonid ja deleetsioonid, mis mõjutavad lokuseid, millel võib olla seos kasvajavastaste geenide kaotusega. Täpsemalt on BFTC-905-l kromosoomi 8p21 deleetsioon, piirkond, mis kaob sageli agressiivse TCC korral ja on seotud tuumori supressorgeenidega. See tsütogeneetiline keerukus pakub väärtuslikku võimalust analüüsida geeni funktsiooni genoomse ebastabiilsuse kontekstis, mis on hilisstaadiumis põievähi tunnuseks.

BFTC-905 on kaasatud ka suuremahulistesse farmakogenoomilistesse uuringutesse, nagu Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) ja Genomics of Drug Sensitivity in Cancer (GDSC). Need ressursid on kinnitanud BFTC-905 molekulaarset vastavust esmaste põievähi kasvajatega ja võimaldanud selle kasutamist vähivastaste ravimite toime prognoosimisel. Selle mitme omika profiil – sealhulgas geeniekspressioon, mutatsioonide olemasolu, koopiaarvu variatsioon ja DNA metülatsioon – teeb sellest võimsa mudeli põievähi spetsiifiliste ravimite sihtmärkide ja resistentsusmehhanismide uurimiseks.

Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
  • BFTC 905
  • BFTC905
  • Black Foot disease Transitional Carcinoma 905

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Epiteel
Kahekordistumisaeg
60–70 tundi

04Tunnused

Viide
BFTC-905 (Cytioni katalooginumber 305749)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1083

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD; MD; LD
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: NRAS, lihtne, p.Gln61Leu (c.182A>T), heterosügootne (Cosmic-CLP=910926), TP53, lihtne, c.673-2A>T (IVS6-2A>T), homosügootne, märkus = splaissingu aktseptori mutatsioon (Cosmic-CLP=910926)
Viirused
Pöördtranskriptaasi negatiivne; PCR: EBV negatiivne, HBV negatiivne, HCV negatiivne, HHV-8 negatiivne, HIV-1 negatiivne, HIV-2 negatiivne, HTLV-1/2 negatiivne, MLV negatiivne, SMRV negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
51 aastat
Etniline kuuluvus
Hiina