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CW-2

Cell line · Artikelnummer 305134

The CW-2 cell line is derived from human colorectal carcinoma. Established from the tumor tissue of a female patient, this cell line exhibits epithelial m...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die CW-2-Zelllinie stammt vom menschlichen kolorektalen Karzinom. Diese Zelllinie, die aus dem Tumorgewebe einer Patientin gewonnen wurde, weist eine epitheliale Morphologie auf und wurde in erster Linie zur Untersuchung der Mechanismen von Darmkrebs, einschließlich Tumorwachstum, Metastasierung und der Mikroumgebung des Tumors, verwendet. Die CW-2-Zellen sind für ihre robuste Fähigkeit bekannt, Kolonien in Weichagar zu bilden, was auf ein hohes Maß an Tumorigenität hinweist und sie zu einem wertvollen Modell für In-vitro-Experimente macht, die sich mit der Aggressivität von Krebs und der Reaktion auf Medikamente befassen.

Genetisch tragen CW-2-Zellen Mutationen, die für Darmkrebs typisch sind, wie z. B. Veränderungen in den APC-, KRAS- und TP53-Genen. Diese Mutationen tragen nicht nur zu ihrem bösartigen Phänotyp bei, sondern machen sie auch relevant für Studien über genetische Signalwege, die am Fortschreiten des Darmkrebses und dem Ansprechen auf eine Therapie beteiligt sind. CW-2 hat in der pharmakologischen Forschung eine wichtige Rolle gespielt und Einblicke in die Wirksamkeit und den Wirkmechanismus verschiedener Chemotherapeutika gewährt. Darüber hinaus kann ihre Reaktion auf umweltbedingte und genetische Veränderungen bei der Entwicklung gezielter Therapien für Darmkrebs helfen.

Aufgrund des genetischen Profils und des aggressiven Charakters der CW-2-Zelllinie wird sie auch in der Forschung eingesetzt, die sich mit Krebsstammzellen und der Resistenz gegen Chemotherapie befasst und ein umfassendes Modell für das Verständnis der Dynamik von Krebsresistenz und Rückfällen bietet. Die Forschung mit CW-2-Zellen hilft bei der Entschlüsselung der komplexen Wechselwirkungen innerhalb der Mikroumgebung des Tumors, die das Überleben und die Vermehrung von Krebs unterstützen, und macht sie für die fortgeschrittene Krebsforschung unverzichtbar.

Gewebe
Doppelpunkt
Synonyme
  • CW2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Ja

04Bezeichner

Quellenangabe
CW-2 (Cytion Katalognummer 305134)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1151

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
55 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Asiatisch