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CW-2
Tessuto
Colon
Sinonimi
CW2

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CW-2

Cell line · Codice prodotto 305134

The CW-2 cell line is derived from human colorectal carcinoma. Established from the tumor tissue of a female patient, this cell line exhibits epithelial m...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CW-2 deriva dal carcinoma colorettale umano. Ricavata dal tessuto tumorale di una donna, questa linea cellulare presenta una morfologia epiteliale ed è stata utilizzata principalmente per studiare i meccanismi del cancro del colon-retto, tra cui la crescita del tumore, le metastasi e il microambiente tumorale. Le cellule CW-2 sono note per la loro robusta capacità di formare colonie in agar morbido, indicando un alto grado di tumorigenicità, che le rende un modello prezioso per esperimenti in vitro incentrati sull'aggressività del cancro e sulla risposta ai farmaci.

Dal punto di vista genetico, le cellule CW-2 presentano mutazioni tipiche dei tumori del colon-retto, come alterazioni nei geni APC, KRAS e TP53. Queste mutazioni non solo contribuiscono al loro fenotipo maligno, ma le rendono anche importanti per gli studi sulle vie genetiche coinvolte nella progressione del cancro colorettale e nella risposta alla terapia. Il CW-2 è stato determinante per la ricerca farmacologica, fornendo approfondimenti sull'efficacia e sul meccanismo d'azione di vari agenti chemioterapici. Inoltre, la loro risposta alle modifiche ambientali e genetiche può contribuire allo sviluppo di terapie mirate per il cancro del colon-retto.

Grazie al profilo genetico e alla natura aggressiva della linea cellulare CW-2, essa viene utilizzata anche nella ricerca sulle cellule staminali del cancro e sulla resistenza alla chemioterapia, offrendo un modello completo per la comprensione delle dinamiche di resistenza e ricaduta dei trattamenti antitumorali. La ricerca che utilizza le cellule CW-2 aiuta a decifrare le complesse interazioni all'interno del microambiente tumorale che supportano la sopravvivenza e la proliferazione del cancro, rendendole indispensabili nella ricerca avanzata sul cancro.

Tessuto
Colon
Sinonimi
  • CW2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CW-2 (numero di catalogo Cytion 305134)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1151

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
55 anni
Etnia
Asiatico