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HCC78
Gewebe
Pleuraerguss
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
HCC-78, HCC0078, Hamon Cancer Center 78

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HCC78

Cell line · Artikelnummer 302156

HCC78 is a cell line derived from a primary tumor of a lung adenocarcinoma, specifically a subtype known as mucinous bronchioloalveolar carcinoma. This ce...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HCC78 ist eine Zelllinie, die von einem Primärtumor eines Lungenadenokarzinoms abgeleitet ist, und zwar von einem Subtyp, der als muzinöses bronchioloalveoläres Karzinom bekannt ist. Diese Zelllinie wurde von einem männlichen erwachsenen Patienten hergestellt. HCC78-Zellen zeichnen sich durch ein einzigartiges chromosomales Rearrangement aus, an dem die Gene ROS1 und SLC34A2 beteiligt sind und das zum Fusionsprotein SLC34A2-ROS1 führt. Dieses Fusionsprotein ist in onkogene Signalwege involviert, was HCC78 zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen von ROS1-fusionspositivem Lungenkrebs und für die Erprobung gezielter Therapien gegen ROS1 macht.

In der Forschung wurde HCC78 ausgiebig genutzt, um die Wirksamkeit und den Wirkmechanismus von ROS1-Inhibitoren zu untersuchen. Diese Studien haben die Nützlichkeit der Zelllinie bei der präklinischen Bewertung der Empfindlichkeit gegenüber Arzneimitteln, der Resistenzmechanismen und der von der ROS1-Aktivität betroffenen zellulären Signalwege gezeigt. Die Zelllinie wächst adhärent und weist eine epithelähnliche Morphologie auf, die für bronchioloalveoläre Tumoren charakteristisch ist. Die genetischen und phänotypischen Merkmale von HCC78 machen sie zu einem wichtigen Werkzeug für die Lungenkrebsforschung, insbesondere für Untersuchungen, die sich auf gezielte Therapien und personalisierte Medizin bei der Behandlung von ROS1-positiven Krebsarten konzentrieren.

Gewebe
Pleuraerguss
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • HCC-78
  • HCC0078
  • Hamon Cancer Center 78

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
HCC78 (Cytion Katalognummer 302156)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2061

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
65 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch