
- Tissue
- Derrame pleural
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCC-78, HCC0078, Hamon Cancer Center 78
Documents
01General information
- Description
A HCC78 é uma linhagem celular derivada de um tumor primário de adenocarcinoma de pulmão, especificamente de um subtipo conhecido como carcinoma bronquioloalveolar mucinoso. Essa linhagem celular foi estabelecida a partir de um paciente adulto do sexo masculino. As células HCC78 são particularmente conhecidas por apresentarem um rearranjo cromossômico único envolvendo os genes ROS1 e SLC34A2, o que resulta na proteína de fusão SLC34A2-ROS1. Essa proteína de fusão tem sido associada a vias de sinalização oncogênicas, tornando a HCC78 um modelo valioso para o estudo dos mecanismos moleculares dos cânceres de pulmão positivos para fusão ROS1 e para o teste de terapias direcionadas contra o ROS1.
Em contextos de pesquisa, a HCC78 tem sido amplamente utilizada para explorar a eficácia e o mecanismo de ação dos inibidores de ROS1. Esses estudos demonstraram a utilidade da linhagem celular em avaliações pré-clínicas de sensibilidade a medicamentos, mecanismos de resistência e as vias celulares afetadas pela atividade de ROS1. A linhagem celular cresce de forma aderente e apresenta morfologia de tipo epitelial, característica dos tumores bronquioloalveolares. As características genéticas e fenotípicas da HCC78 a tornam uma ferramenta essencial para a pesquisa do câncer de pulmão, especialmente para investigações focadas em terapias direcionadas e medicina personalizada no tratamento de cânceres ROS1-positivos.
- Tissue
- Derrame pleural
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- HCC-78
- HCC0078
- Hamon Cancer Center 78
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HCC78 (número de catálogo da Cytion 302156)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2061
04Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
06Donor
- Donor age
- 65 anos
- Ethnicity
- Europeu
07Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes