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HCC78
Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
HCC-78, HCC0078, Hamon Cancer Center 78

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HCC78

Cell line · Codice prodotto 302156

HCC78 is a cell line derived from a primary tumor of a lung adenocarcinoma, specifically a subtype known as mucinous bronchioloalveolar carcinoma. This ce...

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01Informazioni generali

Descrizione

HCC78 è una linea cellulare derivata da un tumore primario di adenocarcinoma polmonare, nello specifico un sottotipo noto come carcinoma bronchioloalveolare mucinoso. Questa linea cellulare è stata ottenuta da un paziente maschio adulto. Le cellule HCC78 sono particolarmente note per ospitare un riarrangiamento cromosomico unico che coinvolge i geni ROS1 e SLC34A2, che risulta nella proteina di fusione SLC34A2-ROS1. Questa proteina di fusione è stata implicata nelle vie di segnalazione oncogenica, rendendo l'HCC78 un modello prezioso per studiare i meccanismi molecolari dei tumori polmonari positivi alla fusione ROS1 e per testare terapie mirate contro ROS1.

In contesti di ricerca, HCC78 è stato ampiamente utilizzato per esplorare l'efficacia e il meccanismo d'azione degli inibitori di ROS1. Questi studi hanno dimostrato l'utilità della linea cellulare nella valutazione preclinica della sensibilità ai farmaci, dei meccanismi di resistenza e delle vie cellulari interessate dall'attività di ROS1. La linea cellulare cresce in modo aderente e presenta una morfologia simile a quella epiteliale, caratteristica dei tumori bronchioloalveolari. Le caratteristiche genetiche e fenotipiche di HCC78 ne fanno uno strumento essenziale per la ricerca sul cancro del polmone, in particolare per le indagini incentrate sulle terapie mirate e sulla medicina personalizzata nel trattamento dei tumori ROS1-positivi.

Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • HCC-78
  • HCC0078
  • Hamon Cancer Center 78

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
HCC78 (numero di catalogo Cytion 302156)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2061

04Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

06Donatore

Età dei donatori
65 anni
Etnia
Europeo