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HROGas03
Gewebe
Magen
Krankheit
Adenokarzinom des Magens

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HROGas03

Cell line · Artikelnummer 300437

The HROGas03 cell line is derived from the gastric adenocarcinoma of an adult female patient. Gastric adenocarcinoma, a common type of stomach cancer, ari...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie HROGas03 wurde aus dem Magenadenokarzinom einer erwachsenen Patientin gewonnen. Das Adenokarzinom des Magens, eine häufige Form von Magenkrebs, entsteht aus den Drüsenepithelzellen der Magenschleimhaut und ist häufig mit einer schlechten Prognose verbunden. Als Modell stellt HROGas03 eine unschätzbare Ressource für die Untersuchung der molekularen Signalwege dar, die an der Entstehung, dem Fortschreiten und der Therapieresistenz des Magenadenokarzinoms beteiligt sind. Die altersbedingten Aspekte des Spenders, wie z. B. eine potenzielle genomische Instabilität und Veränderungen in der Mikroumgebung des Tumors, können einzigartige Einblicke in die Krebsbiologie älterer Menschen liefern.

Diese Zelllinie ermöglicht es den Forschern, wichtige molekulare Mechanismen zu erforschen, die Magenkrebs auslösen, wie Mutationen in Tumorsuppressorgenen (z. B. TP53), Veränderungen im Zellzyklus und dysregulierte Signalwege, einschließlich der Wnt-, MAPK- und PI3K/AKT-Wege. Diese Signalwege werden häufig mit dem Überleben, der Proliferation und dem metastatischen Potenzial von Magenkrebszellen in Verbindung gebracht. Die HROGas03-Zelllinie kann auch verwendet werden, um die Wirksamkeit von zielgerichteten Therapien, Chemotherapeutika oder Kombinationsbehandlungen zu bewerten, was zu verbesserten therapeutischen Strategien für Magenkrebspatienten, insbesondere bei älteren Menschen, führen könnte.

Gewebe
Magen
Krankheit
Adenokarzinom des Magens

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
HROGas03 (Cytion Katalognummer 300437)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2U70

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
80 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch