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HROGas03
Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico

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HROGas03

Cell line · Codice prodotto 300437

The HROGas03 cell line is derived from the gastric adenocarcinoma of an adult female patient. Gastric adenocarcinoma, a common type of stomach cancer, ari...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HROGas03 deriva dall'adenocarcinoma gastrico di un paziente adulto di sesso femminile. L'adenocarcinoma gastrico, un tipo comune di cancro allo stomaco, si origina dalle cellule epiteliali ghiandolari del rivestimento dello stomaco ed è spesso associato a una prognosi sfavorevole. Come modello, HROGas03 fornisce una risorsa inestimabile per studiare le vie molecolari coinvolte nell'iniziazione, nella progressione e nella resistenza terapeutica dell'adenocarcinoma gastrico. Gli aspetti legati all'età del donatore, come la potenziale instabilità genomica e le alterazioni del microambiente tumorale, possono fornire approfondimenti unici sulla biologia del cancro negli individui anziani.

Questa linea cellulare consente ai ricercatori di esplorare i meccanismi molecolari chiave che guidano il cancro gastrico, come le mutazioni nei geni soppressori del tumore (ad esempio, TP53), le alterazioni del ciclo cellulare e le vie di segnalazione disregolate, tra cui le vie Wnt, MAPK e PI3K/AKT. Queste vie sono spesso implicate nella sopravvivenza, nella proliferazione e nel potenziale metastatico delle cellule di cancro gastrico. La linea cellulare HROGas03 può essere utilizzata anche per valutare l'efficacia di terapie mirate, agenti chemioterapici o trattamenti combinati, portando potenzialmente a migliori strategie terapeutiche per i pazienti affetti da cancro gastrico, soprattutto nelle fasce demografiche più anziane.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HROGas03 (numero di catalogo Cytion 300437)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2U70

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
80 anni
Etnia
Caucasico