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VCaP
Gewebe
Prostata
Krankheit
Prostata-Karzinom
Metastasenherd
Knochen, Wirbel
Synonyme
VCAP, Vcap, Vertebral Cancer of the Prostate

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VCaP

Cell line · Artikelnummer 300631

The VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) cell line is an important model in the study of prostate cancer, derived from a vertebral metastasis of a huma...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die VCaP-Zelllinie (Vertebral-Krebs der Prostata) ist ein wichtiges Modell für die Erforschung von Prostatakrebs, das von einer Wirbelmetastase eines menschlichen Prostatakarzinoms stammt. Sie wurde geschaffen, um ein relevantes In-vitro-Modell für die Erforschung der Biologie des Prostatakrebses und seines Metastasierungsprozesses bereitzustellen, wobei der Schwerpunkt auf den hormonrefraktären Stadien der Krankheit liegt. VCaP-Zellen sind dafür bekannt, dass sie ein hohes Maß an prostataspezifischem Antigen (PSA) und Androgenrezeptor (AR) exprimieren, was sie für Studien über Androgenrezeptor-Signalwege und Resistenzmechanismen gegenüber Antiandrogen-Therapien äußerst relevant macht.

VCaP-Zellen werden auch ausgiebig für genetische Studien genutzt, da sie die TMPRSS2-ERG-Genfusion beherbergen, eine häufige chromosomale Translokation, die in etwa 50 % der Prostatakrebsfälle gefunden wird. Diese spezifische genetische Veränderung ist von Bedeutung, da man annimmt, dass sie eine entscheidende Rolle beim Fortschreiten von Prostatakrebs spielt. Die Zellen sind daher ein hervorragendes Instrument für die Forschung zum Verständnis der molekularen Grundlagen von Prostatakrebs und für die Entwicklung neuer therapeutischer Strategien, die auf TMPRSS2-ERG und verwandte Signalwege abzielen. Darüber hinaus weisen VCaP-Zellen ein robustes In-vitro-Wachstum auf und können Tumore bilden, wenn sie in immundefizienten Mäusen xenotransplantiert werden, was ein nützliches System für präklinische Studien neuer Krebsmedikamente darstellt.

Insgesamt ist die VCaP-Zelllinie eine wichtige Ressource für molekulare und pharmakologische Studien, die wesentlich zum Verständnis der Biologie des Prostatakrebses und zur Bewertung neuer therapeutischer Wirkstoffe beiträgt. Ihre Eigenschaften, einschließlich der Hormonempfindlichkeit, der Expression von Genfusionen und des metastatischen Ursprungs, machen sie einzigartig geeignet für die fortgeschrittene Prostatakrebsforschung, insbesondere in Bereichen, die mit der Androgenunabhängigkeit und dem metastatischen Krankheitsverlauf zusammenhängen.

Gewebe
Prostata
Krankheit
Prostata-Karzinom
Metastasenherd
Knochen, Wirbel
Synonyme
  • VCAP
  • Vcap
  • Vertebral Cancer of the Prostate

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Tumorauslösend
Ja, bei SCID-Mäusen
Verdopplungszeit
Langsam wachsende Zelllinie, Verdopplungszeit 5-6 Tage.

04Bezeichner

Quellenangabe
VCaP (Cytion Katalognummer 300631)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2235

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
P53-Antigen, Cytokeratin-18, prostataspezifisches Antigen, saure Phosphatase der Prostata, Rb-Protein
Viren
Xenotropes Maus-Retrovirus Bxv-1

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
4–8 x 104 Zellen/cm²
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
59 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch