Pāriet uz saturu
VCaP
Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas karcinoma
Metastāžu vieta
Kauls, skriemelis
Sinonīmi
VCAP, Vcap, Vertebral Cancer of the Prostate

Dokumenti

VCaP

Cell line · Preces numurs 300631

The VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) cell line is an important model in the study of prostate cancer, derived from a vertebral metastasis of a huma...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) šūnu līnija ir svarīgs prostatas vēža izpētes modelis, kas iegūts no cilvēka prostatas karcinomas mugurkaula metastāzēm. Tā tika izveidota, lai nodrošinātu atbilstošu in vitro modeli prostatas vēža bioloģijas un tā metastātiskā procesa izpētei, jo īpaši pievēršot uzmanību hormonāli rezistentām slimības stadijām. VCaP šūnas ir pazīstamas ar augstu prostatas specifiskā antigēna (PSA) un androgēnu receptoru (AR) ekspresijas līmeni, tāpēc tās ir ļoti piemērotas pētījumiem par androgēnu receptoru signalizācijas ceļiem un rezistences mehānismiem pret antiandrogēnu terapiju.

VCaP šūnas tiek plaši izmantotas arī ģenētiskajos pētījumos, jo tajās ir TMPRSS2-ERG gēnu saplūšana, kas ir izplatīta hromosomu translokācija, kura konstatēta aptuveni 50 % prostatas vēža gadījumu. Šī īpašā ģenētiskā pārmaiņa ir nozīmīga, jo tiek uzskatīts, ka tai ir būtiska nozīme prostatas vēža progresēšanā. Tādējādi šīs šūnas ir lielisks instruments pētījumiem, kuru mērķis ir izprast prostatas vēža molekulāro pamatu un izstrādāt jaunas terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas uz TMPRSS2-ERG un ar to saistītajiem ceļiem. Turklāt VCaP šūnām piemīt spēcīga in vitro augšana, un tās var veidot audzējus, ja tās ksenogrāfē imūndeficītām pelēm, tādējādi nodrošinot noderīgu sistēmu jaunu pretvēža zāļu pirmsklīniskajiem pētījumiem.

Kopumā VCaP šūnu līnija kalpo kā būtisks resurss molekulāriem un farmakoloģiskiem pētījumiem, būtiski veicinot izpratni par prostatas vēža bioloģiju un jaunu terapeitisko līdzekļu novērtēšanu. Tās īpašības, tostarp reaģētspēja uz hormoniem, gēnu saplūšanas ekspresija un metastātiska izcelsme, padara to unikāli piemērotu progresīvu prostatas vēža pētījumu veikšanai, jo īpaši jomās, kas saistītas ar androgēnu neatkarību un metastātisku slimības progresēšanu.

Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas karcinoma
Metastāžu vieta
Kauls, skriemelis
Sinonīmi
  • VCAP
  • Vcap
  • Vertebral Cancer of the Prostate

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Jā, SCID pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
Lēni augoša šūnu līnija, dubultošanās laiks 5-6 dienas.

04Identifikatori

Atsauce
VCaP (Cytion kataloga numurs 300631)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2235

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
P53 antigēns, citokeratīns-18, prostatas specifiskais antigēns, prostatas skābes fosfatāze, Rb proteīns
Vīrusi
Peļu ksenotropais retrovīruss Bxv-1

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
4–8 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
59 gadi
Etniskā piederība
Eiropas