Mine otse sisu juurde
VCaP
Kude
Eesnäärme
Haigus
Eesnäärme kantsinoom
Metastaaside asukoht
Luu, selgroog
Sünonüümid
VCAP, Vcap, Vertebral Cancer of the Prostate

Dokumendid

VCaP

Cell line · Toote number 300631

The VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) cell line is an important model in the study of prostate cancer, derived from a vertebral metastasis of a huma...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) rakuliin on oluline mudel eesnäärmevähi uurimisel, mis on saadud inimese eesnäärmekartsinoomi vertebraalsest metastaasist. See loodi selleks, et pakkuda asjakohast in vitro mudelit eesnäärmevähi bioloogia ja selle metastaatilise protsessi uurimiseks, keskendudes eelkõige hormoonresistentse haiguse staadiumile. VCaP rakud ekspresseerivad teatavasti suurel määral eesnäärme-spetsiifilist antigeeni (PSA) ja androgeeni retseptorit (AR), mistõttu on need väga olulised androgeeni retseptori signaaliradade ja androgeenivastase ravi suhtes resistentsuse mehhanismide uurimiseks.

VCaP rakke kasutatakse laialdaselt ka geneetilistes uuringutes, kuna nad kannavad TMPRSS2-ERG geeni fusiooni, mis on levinud kromosomaalne translokatsioon, mida leidub ligikaudu 50%-l eesnäärmevähi juhtudest. See konkreetne geneetiline muutus on oluline, sest arvatakse, et see mängib olulist rolli eesnäärmevähi progresseerumises. Seega on need rakud suurepärane vahend teadusuuringuteks, mille eesmärk on mõista eesnäärmevähi molekulaarseid aluseid ja arendada uusi ravistrateegiaid, mis on suunatud TMPRSS2-ERG-le ja sellega seotud radadele. Lisaks sellele on VCaP rakud in vitro tugevalt kasvavad ja suudavad immuunpuudulikku hiirtesse ksenotransplanteerituna moodustada kasvajaid, mis on kasulik süsteem uute vähivastaste ravimite prekliinilisteks uuringuteks.

Kokkuvõttes on VCaP rakuliin oluline ressurss molekulaarsete ja farmakoloogiliste uuringute jaoks, mis aitab oluliselt kaasa eesnäärmevähi bioloogia mõistmisele ja uute raviainete hindamisele. Selle omadused, sealhulgas hormoonidele reageerimine, geenifusiooni ekspressioon ja metastaatiline päritolu, muudavad selle ainulaadseks eesnäärmevähi edasijõudnute uuringuteks, eelkõige androgeenidest sõltumatuse ja metastaatilise haiguse progresseerumisega seotud valdkondades.

Kude
Eesnäärme
Haigus
Eesnäärme kantsinoom
Metastaaside asukoht
Luu, selgroog
Sünonüümid
  • VCAP
  • Vcap
  • Vertebral Cancer of the Prostate

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Jah, SCID hiirtel
Kahekordistumisaeg
Aeglaselt kasvav rakuliin, kahekordistumisaeg 5-6 päeva.

04Tunnused

Viide
VCaP (Cytioni katalooginumber 300631)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2235

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
P53 antigeen, tsütokeratiin-18, eesnäärme-spetsiifiline antigeen, eesnäärme happeline fosfataas, Rb valk
Viirused
Hiire ksenotroopne retroviirus Bxv-1

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
4–8 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
59 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa