.jpg)
- Kudos
- Eturauhanen
- Sairaus
- Eturauhasen syöpä
- Metastaasikohde
- Luu, nikama
- Synonyymit
- VCAP, Vcap, Vertebral Cancer of the Prostate
Asiakirjat
VCaP
Cell line · Tuotenumero 300631
The VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) cell line is an important model in the study of prostate cancer, derived from a vertebral metastasis of a huma...
Räätälöinti / Suositukset
- VCaPCell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
VCaP-solulinja (Vertebral-Cancer of the Prostate) on tärkeä malli eturauhassyövän tutkimuksessa, ja se on peräisin ihmisen eturauhassyövän nikamametastaasista. Se perustettiin, jotta se olisi relevantti in vitro -malli eturauhassyövän biologian ja sen etäpesäkkeiden muodostumisprosessin tutkimiseen, erityisesti keskittyen taudin hormoniresistentteihin vaiheisiin. VCaP-solujen tiedetään ilmentävän runsaasti eturauhaspesifistä antigeenia (PSA) ja androgeenireseptoria (AR), minkä vuoksi ne ovat erittäin merkityksellisiä androgeenireseptorin signaalireittejä ja antiandrogeenihoidon resistenssimekanismeja koskevissa tutkimuksissa.
VCaP-soluja hyödynnetään laajasti myös geneettisissä tutkimuksissa, sillä niissä on TMPRSS2-ERG-geenifuusio, joka on yleinen kromosomitranslokaatio, jota esiintyy noin 50 prosentissa eturauhassyöpätapauksista. Tämä erityinen geneettinen muutos on merkittävä, koska sillä uskotaan olevan ratkaiseva rooli eturauhassyövän etenemisessä. Solut ovat näin ollen erinomainen väline tutkimukseen, jolla pyritään ymmärtämään eturauhassyövän molekulaarisia taustatekijöitä ja kehittämään uusia terapeuttisia strategioita, jotka kohdistuvat TMPRSS2-ERG:hen ja siihen liittyviin reitteihin. Lisäksi VCaP-solut kasvavat voimakkaasti in vitro ja voivat muodostaa kasvaimia, kun ne siirretään immuunipuutteisiin hiiriin, mikä tarjoaa käyttökelpoisen järjestelmän uusien syöpälääkkeiden prekliinisiin tutkimuksiin.
Kaiken kaikkiaan VCaP-solulinja on elintärkeä resurssi molekulaarisia ja farmakologisia tutkimuksia varten, mikä edistää merkittävästi eturauhassyövän biologian ymmärtämistä ja uusien terapeuttisten aineiden arviointia. Sen ominaisuudet, kuten hormonireagoivuus, geenifuusioekspressio ja metastaattinen alkuperä, tekevät siitä ainutlaatuisen sopivan eturauhassyövän pitkälle edenneeseen tutkimukseen erityisesti androgeeniriippumattomuuteen ja metastaattisen taudin etenemiseen liittyvillä aloilla.
- Kudos
- Eturauhanen
- Sairaus
- Eturauhasen syöpä
- Metastaasikohde
- Luu, nikama
- Synonyymit
- VCAP
- Vcap
- Vertebral Cancer of the Prostate
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, SCID-hiirillä
- Kaksinkertaistumisaika
- Hitaasti kasvava solulinja, kaksinkertaistumisaika 5-6 päivää.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- VCaP (Cytionin luettelonumero 300631)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2235
05Ilmentyminen ja alttius
- Antigeenin ilmentyminen
- P53-antigeeni, sytokeratiini-18, eturauhaspesifinen antigeeni, eturauhasen happo fosfataasi, Rb-proteiini
- Virukset
- Hiiren ksenotrooppinen retrovirus Bxv-1
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 4–8 x 104 solua/cm2
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 59 vuotta
- Etnisyys
- Eurooppalainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä