Přejít na obsah
VCaP
Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom prostaty
Místo metastázy
Kost, obratel
Synonyma
VCAP, Vcap, Vertebral Cancer of the Prostate

Dokumenty

VCaP

Cell line · Číslo výrobku 300631

The VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) cell line is an important model in the study of prostate cancer, derived from a vertebral metastasis of a huma...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie VCaP (Vertebral-Cancer of the Prostate) je důležitým modelem pro studium karcinomu prostaty, odvozeným z vertebrální metastázy lidského karcinomu prostaty. Byla vytvořena s cílem poskytnout relevantní in vitro model pro výzkum biologie karcinomu prostaty a jeho metastatického procesu, zejména se zaměřením na hormonálně refrakterní stadia onemocnění. Buňky VCaP jsou známé tím, že exprimují vysokou hladinu prostatického specifického antigenu (PSA) a androgenního receptoru (AR), takže jsou velmi vhodné pro studium signálních drah androgenního receptoru a mechanismů rezistence na antiandrogenní terapii.

Buňky VCaP se také hojně využívají v genetických studiích, protože obsahují fúzi genů TMPRSS2-ERG, což je běžná chromozomální translokace, která se vyskytuje přibližně u 50 % případů rakoviny prostaty. Tato specifická genetická změna je významná, protože se předpokládá, že hraje klíčovou roli při progresi karcinomu prostaty. Tyto buňky jsou proto vynikajícím nástrojem pro výzkum zaměřený na pochopení molekulárních základů rakoviny prostaty a pro vývoj nových terapeutických strategií zaměřených na TMPRSS2-ERG a související dráhy. Buňky VCaP navíc vykazují robustní růst in vitro a mohou vytvářet nádory při xenotransplantaci na imunodeficitních myších, což představuje užitečný systém pro preklinické studie nových protinádorových léčiv.

Celkově lze říci, že buněčná linie VCaP slouží jako důležitý zdroj pro molekulární a farmakologické studie a významně přispívá k pochopení biologie karcinomu prostaty a k hodnocení nových terapeutických látek. Její vlastnosti, včetně reaktivity na hormony, exprese genové fúze a metastatického původu, ji činí jedinečně vhodnou pro pokročilý výzkum karcinomu prostaty, zejména v oblastech souvisejících s nezávislostí na androgenech a progresí metastatického onemocnění.

Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom prostaty
Místo metastázy
Kost, obratel
Synonyma
  • VCAP
  • Vcap
  • Vertebral Cancer of the Prostate

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano, u myší SCID
Doba zdvojnásobení
Pomalu rostoucí buněčná linie, doba zdvojení 5-6 dní.

04Identifikátory

Citace
VCaP (katalogové číslo Cytion 300631)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2235

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Antigen P53, cytokeratin-18, prostatický specifický antigen, prostatická kyselá fosfatáza, protein Rb
Viry
Myší xenotropní retrovirus Bxv-1

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
4–8 x 104 buněk/cm2
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
59 let
Etnická příslušnost
Evropská