Mine otse sisu juurde
IGR-1 rakud
Kude
Nahk
Haigus
Pahaloomuline melanoom
Metastaaside asukoht
Liigeselümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
IGR 1, IGR1, Institut Gustave Roussy-1

Dokumendid

IGR-1 rakud

Cell line · Toote number 300219

IGR-1 rakuliin on saadud inimese pahaloomulisest melanoomist, mistõttu on see väärtuslik mudel melanoomi patofüsioloogia uurimiseks ja antik...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

IGR-1 rakuliin on saadud inimese pahaloomulisest melanoomist, mistõttu on see väärtuslik mudel melanoomi patofüsioloogia uurimiseks ja vähivastaste ravimeetodite testimiseks. Need rakud on epiteliaalsed ja neil on agressiivsele melanoomile iseloomulikud omadused, sealhulgas kiire proliferatsioon ja võime moodustada kolooniaid pehmel agaril, mis on onkogeense transformatsiooni tunnuseks. IGR-1 rakuliin on eriti kasulik uuringutes, mis keskenduvad melanoomi progresseerumist põhjustavate molekulaarsete mehhanismide mõistmisele, samuti sihtteraapiate ja immunoteraapiate väljatöötamisele ja testimisele.

IGR-1 rakkudel on melanoomi puhul levinud mutatsioonid, sealhulgas muutused MAPK/ERK-ahelas, mis on selle vähitüübi puhul sageli düsreguleeritud. Need mutatsioonid aitavad kaasa rakuliini võimele kontrollimatult paljuneda ja apoptoosile vastu seista. Teadlased kasutavad IGR-1 rakke, et uurida erinevate inhibiitorite mõju sellele signaaliradale, mis annab ülevaate võimalikest ravistrateegiatest. Lisaks sellele sobib rakuliin melanoomiga seotud antigeenide ekspressiooni tõttu melanoomi vastase immuunvastuse uurimiseks, sealhulgas uute immuunterapeutiliste lähenemisviiside väljatöötamiseks.

Kude
Nahk
Haigus
Pahaloomuline melanoom
Metastaaside asukoht
Liigeselümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
  • IGR 1
  • IGR1
  • Institut Gustave Roussy-1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Polügonaalne
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.

04Tunnused

Viide
IGR-1 (Cytioni katalooginumber 300219)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1303

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
IGR-1 rakud kannavad heterosügootset BRAFV600K mutatsiooni, kuid on BRAFV600E suhtes metsikut tüüpi.
Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
3 x 104/cm2 pärast sulatamist, 1 kuni 2 x 104/cm2 rutiinseks jagamiseks
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
1 kuni 2 päeva
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
42 aastat