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Cellule IGR-1
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma maligno
Sito metastatico
Linfonodo inguinale
Sinonimi
IGR 1, IGR1, Institut Gustave Roussy-1

Documenti

Cellule IGR-1

Cell line · Codice prodotto 300219

La linea cellulare IGR-1 deriva da un melanoma maligno umano, il che la rende un modello prezioso per lo studio della fisiopatologia del melanoma e per la sperimentazione di farmaci anti-c...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare IGR-1 deriva da un melanoma maligno umano e rappresenta un modello prezioso per lo studio della fisiopatologia del melanoma e la sperimentazione di terapie antitumorali. Queste cellule sono di natura epiteliale e presentano caratteristiche tipiche del melanoma aggressivo, tra cui una rapida proliferazione e la capacità di formare colonie in agar morbido, un segno distintivo della trasformazione oncogenica. La linea cellulare IGR-1 è particolarmente utile per la ricerca incentrata sulla comprensione dei meccanismi molecolari che guidano la progressione del melanoma, nonché per lo sviluppo e la sperimentazione di terapie mirate e immunoterapie.

Le cellule IGR-1 ospitano mutazioni comuni nel melanoma, tra cui alterazioni nella via MAPK/ERK, spesso disregolata in questo tipo di tumore. Queste mutazioni contribuiscono alla capacità della linea cellulare di proliferare in modo incontrollato e di resistere all'apoptosi. I ricercatori utilizzano le cellule IGR-1 per studiare gli effetti di vari inibitori su questa via di segnalazione, fornendo indicazioni su potenziali strategie terapeutiche. Inoltre, l'espressione di antigeni associati al melanoma rende questa linea cellulare adatta allo studio delle risposte immunitarie contro il melanoma, compreso lo sviluppo di nuovi approcci immunoterapeutici.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma maligno
Sito metastatico
Linfonodo inguinale
Sinonimi
  • IGR 1
  • IGR1
  • Institut Gustave Roussy-1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Poligonale
Tumorigenico
Sì, in topi nudi.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
IGR-1 (numero di catalogo Cytion 300219)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1303

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Le cellule IGR-1 presentano una mutazione eterozigote di BRAFV600K, ma sono wild type rispetto a BRAFV600E.
Prodotti
Melanina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
3 x 104/cm2 dopo lo scongelamento, da 1 a 2 x 104/cm2 per la divisione di routine
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
da 1 a 2 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
42 anni