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Células IGR-1
Tecido
Pele
Doença
Melanoma maligno
Local da metástase
Nódulo linfático da virilha
Sinónimos
IGR 1, IGR1, Institut Gustave Roussy-1

Documentos

Células IGR-1

Cell line · Número do produto 300219

A linha celular IGR-1 é derivada de um melanoma maligno humano, o que a torna um modelo valioso para o estudo da fisiopatologia do melanoma e para o teste de agentes anti-c...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular IGR-1 é derivada de um melanoma maligno humano, o que a torna um modelo valioso para estudar a fisiopatologia do melanoma e testar terapias anti-cancro. Estas células são de natureza epitelial e apresentam caraterísticas típicas do melanoma agressivo, incluindo a rápida proliferação e a capacidade de formar colónias em ágar macio, uma caraterística da transformação oncogénica. A linha de células IGR-1 é particularmente útil na investigação centrada na compreensão dos mecanismos moleculares que conduzem à progressão do melanoma, bem como no desenvolvimento e teste de terapias direcionadas e imunoterapias.

As células IGR-1 contêm mutações comuns no melanoma, incluindo alterações na via MAPK/ERK, que é frequentemente desregulada neste tipo de cancro. Estas mutações contribuem para a capacidade da linha celular de proliferar incontrolavelmente e resistir à apoptose. Os investigadores utilizam as células IGR-1 para investigar os efeitos de vários inibidores nesta via de sinalização, fornecendo informações sobre potenciais estratégias terapêuticas. Além disso, a expressão de antigénios associados ao melanoma por parte desta linha celular torna-a adequada para estudar as respostas imunitárias contra o melanoma, incluindo o desenvolvimento de novas abordagens imunoterapêuticas.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma maligno
Local da metástase
Nódulo linfático da virilha
Sinónimos
  • IGR 1
  • IGR1
  • Institut Gustave Roussy-1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Poligonal
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus.

04Identificadores

Referência
IGR-1 (número de catálogo Cytion 300219)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1303

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
As células IGR-1 são portadoras de uma mutação BRAFV600K heterozigótica, mas são de tipo selvagem relativamente a BRAFV600E.
Produtos
Melanina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
3 x 104/cm² após descongelamento, 1 a 2 x 104/cm² para divisão de rotina
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
1 a 2 dias
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
42 anos