Pāriet uz saturu
IGR-1 šūnas
Audums
Āda
Slimība
Ļaundabīga melanoma
Metastāžu vieta
Cirkšņa limfmezgls
Sinonīmi
IGR 1, IGR1, Institut Gustave Roussy-1

Dokumenti

IGR-1 šūnas

Cell line · Preces numurs 300219

IGR-1 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka ļaundabīgas melanomas, tādējādi tā ir vērtīgs modelis melanomas patofizioloģijas izpētei un pretmelanomas līdzekļu testēšanai...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

IGR-1 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka ļaundabīgās melanomas, tāpēc tā ir vērtīgs modelis melanomas patofizioloģijas izpētei un pretvēža terapijas testēšanai. Šīm šūnām ir epitēlija raksturs, un tām piemīt agresīvai melanomai raksturīgas īpašības, tostarp ātra proliferācija un spēja veidot kolonijas mīkstā agārā, kas ir onkogēnās transformācijas pazīme. IGR-1 šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumos, kuru mērķis ir izprast molekulāros mehānismus, kas nosaka melanomas progresēšanu, kā arī mērķterapijas un imūnterapijas izstrādē un testēšanā.

IGR-1 šūnās ir melanomai raksturīgas mutācijas, tostarp izmaiņas MAPK/ERK ceļā, kas šajā vēža tipā bieži ir disregulēts. Šīs mutācijas veicina šūnu līnijas spēju nekontrolēti vairoties un pretoties apoptozei. Pētnieki izmanto IGR-1 šūnas, lai izpētītu dažādu inhibitoru ietekmi uz šo signālu ceļu, sniedzot ieskatu potenciālajās terapeitiskajās stratēģijās. Turklāt šūnu līnijas ar melanomu saistīto antigēnu ekspresija padara to piemērotu imūnās atbildes reakcijas pret melanomu izpētei, tostarp jaunu imūnterapeitisku pieeju izstrādei.

Audums
Āda
Slimība
Ļaundabīga melanoma
Metastāžu vieta
Cirkšņa limfmezgls
Sinonīmi
  • IGR 1
  • IGR1
  • Institut Gustave Roussy-1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Daudzstūris
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.

04Identifikatori

Atsauce
IGR-1 (Cytion kataloga numurs 300219)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1303

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
IGR-1 šūnām ir heterozigotiska BRAFV600K mutācija, bet tās ir savvaļas tipa attiecībā uz BRAFV600E.
Produkti
Melanīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
3 x 104/cm2 pēc atkausēšanas, 1 līdz 2 x 104/cm2 parastai sadalīšanai
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
1 līdz 2 dienas
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
42 gadi