Mine otse sisu juurde
AGS
Kude
Mao
Haigus
Adenokartsinoom

Dokumendid

AGS

Cell line · Toote number 300408

AGS cells are a human gastric adenocarcinoma cell line derived from the stomach tissue of a 54-year-old Caucasian female. They are extensively used in bio...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

AGS rakud on inimese mao adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud 54-aastase kaukaasia naise mao koest. Neid kasutatakse laialdaselt maovähki käsitlevates biomeditsiinilistes uuringutes, sealhulgas vähirakkude bioloogia, patogeneesi ja ravimite testimise uuringutes.

AGS rakuliinil on epiteelilaadne morfoloogia ning seda iseloomustab agressiivne kasvumuster ja in vivo kasvupotentsiaal. Neid rakke kasutatakse tavaliselt mudelina mao kantserogeneesi aluseks olevate molekulaar- ja rakumehhanismide, sealhulgas maovähi tuntud riskiteguri Helicobacter pylori infektsiooni mõju uurimiseks. AGS-rakud pakuvad tugevat süsteemi maovähirakkude ja H. pylori vaheliste vastastikmõjude uurimiseks, eelkõige seoses sellega, kuidas bakteriaalsed tegurid mõjutavad vähirakkude proliferatsiooni, apoptoosi ja põletikulisi reaktsioone.

AGS-rakud on väärtuslikud ka maoepiteeli barjääri vastuse uurimiseks erinevatele stiimulitele, sealhulgas põletikulistele tsütokiinidele, ning maovähiga seotud signaaliradade, näiteks NF-kB, Wnt ja MAPK, uurimiseks. Nende kasulikkus laieneb ka uute raviainete hindamisele, kus neid kasutatakse vähivastaste ravimite, sihtteraapiate ja potentsiaalsete vähivastaste omadustega looduslike ühendite tõhususe ja toimemehhanismide hindamiseks.

Lisaks kasutatakse AGS rakke sageli uuringutes, mille eesmärk on mõista maovähi geneetilisi ja epigeneetilisi muutusi, pakkudes teadmisi selle raske ja sageli surmaga lõppeva haiguse võimalike diagnostiliste markerite ja terapeutiliste sihtmärkide kohta.

Kude
Mao
Haigus
Adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, atüümsetel BALB/c hiirtel
Karyotüüp
Modaalarv = 47, vahemik = 39 kuni 92
Kahekordistumisaeg
24 kuni 48 tundi

04Tunnused

Viide
AGS (Cytioni katalooginumber 300408)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0139

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Viirused
See rakuliin võib vabastada Parainfluenzavirus tüüp 5 (varem tuntud kui Simian Virus 5). Viirus häirib rakuliinis interferoonisignaalide andmist STAT1 lagundamise kaudu.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 3–5 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
54 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia