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AGS
Tessuto
Gastrico
Malattia
Adenocarcinoma

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AGS

Cell line · Codice prodotto 300408

AGS cells are a human gastric adenocarcinoma cell line derived from the stomach tissue of a 54-year-old Caucasian female. They are extensively used in bio...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule AGS sono una linea cellulare di adenocarcinoma gastrico umano derivata dal tessuto dello stomaco di una donna caucasica di 54 anni. Sono ampiamente utilizzate nella ricerca biomedica sul cancro gastrico, compresi gli studi sulla biologia delle cellule tumorali, la patogenesi e la sperimentazione di farmaci.

La linea cellulare AGS presenta una morfologia simile a quella epiteliale ed è caratterizzata da un modello di crescita aggressivo e da un potenziale tumorigenico in vivo. Queste cellule sono comunemente utilizzate come modello per studiare i meccanismi molecolari e cellulari alla base della carcinogenesi gastrica, compresa l'influenza dell'infezione da Helicobacter pylori, un noto fattore di rischio per il cancro gastrico. Le cellule AGS forniscono un sistema robusto per esplorare le interazioni tra le cellule tumorali gastriche e l'H. pylori, soprattutto per quanto riguarda il modo in cui i fattori batterici influenzano la proliferazione delle cellule tumorali, l'apoptosi e le risposte infiammatorie.

Le cellule AGS sono anche preziose per esaminare la risposta della barriera epiteliale gastrica a vari stimoli, comprese le citochine infiammatorie, e per studiare le vie di segnalazione implicate nel cancro gastrico, come quelle che coinvolgono NF-kB, Wnt e MAPK. La loro utilità si estende alla valutazione di nuovi agenti terapeutici, dove vengono utilizzati per valutare l'efficacia e i meccanismi d'azione di farmaci antitumorali, terapie mirate e composti naturali con potenziali proprietà antitumorali.

Inoltre, le cellule AGS sono spesso impiegate in studi volti a comprendere le alterazioni genetiche ed epigenetiche del cancro gastrico, offrendo spunti per potenziali marcatori diagnostici e bersagli terapeutici per questa malattia difficile e spesso fatale.

Tessuto
Gastrico
Malattia
Adenocarcinoma

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi atimici BALB/c
Cariotipo
Numero modale = 47, intervallo = 39-92
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
AGS (numero di catalogo Cytion 300408)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0139

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 positivo
Virus
Questa linea cellulare può rilasciare Parainfluenzavirus di tipo 5 (precedentemente noto come Simian Virus 5). Il virus interferisce con la segnalazione dell'interferone all'interno della linea cellulare attraverso la degradazione di STAT1.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 darà origine a un monostrato confluente entro 3-5 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
54 anni
Etnia
Caucasico