Mine otse sisu juurde
HCC1143
Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
HCC-1143, Hamon Cancer Center 1144

Dokumendid

HCC1143

Cell line · Toote number 305545

The HCC1143 cell line is derived from a human triple-negative breast cancer (TNBC), specifically lacking estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC1143 rakuliin on saadud inimese kolmiknegatiivsest rinnavähist (TNBC), millel puudub spetsiaalselt östrogeeni retseptori (ER), progesterooni retseptori (PR) ja HER2 ekspressioon. See rakuliin on tuntud agressiivse rinnavähi fenotüüpide modelleerimiseks ja raviresistentsuse aluseks olevate mehhanismide mõistmiseks. HCC1143-l on erinevad omadused, sealhulgas rakkude alampopulatsioonide heterogeensus, mis aitab kaasa selle olulisusele fenotüüpse plastilisuse ja kasvajarakkude oleku ülemineku uurimisel. HCC1143 uuringutes on näidatud, et erinevad rakkude seisundid selles liinis võivad terapeutilise surve all muutuda luminaalse, basaalse ja mesenhüümilise diferentseerumise seisundite vahel, mis rõhutab selle rolli ravist põhjustatud fenotüübi muutuste ja ravimiresistentsuse mehhanismide uurimisel.

HCC1143 rakke on kasutatud erinevates eksperimentaalsetes kontekstides, sealhulgas kemoteraapia ainetele, nagu paklitakseel, resistentsuse mehhanismide uurimisel. RNA ühe raku sekveneerimine (scRNA-seq) on paljastanud raviresistentsusega seotud diferentseeritud geeniekspressiooniprofiilidega alampopulatsioonid. Näiteks on pikemaajalise paklitakseelravi järel suurenenud selliste spetsiifiliste alampopulatsioonide nagu AKR1C3+, IDO1+ ja HEY1+ rakkude esindatus, mis viitab nende rollile ravimresistentsete fenotüüpidena. Need alatüübid on seotud reaktiivseid hapnikuliike (ROS), põletikulisi reaktsioone ja rakutsükli regulatsiooni hõlmavate radadega, mis viitavad keerulistele kohandustele, mis hõlbustavad ellujäämist kemoterapeutilise stressi all.

HCC1143 uuringuid on laiendatud ka sihtteraapia uuringutele. Selliste komponentide nagu ADAM-17 inhibiitorite kasutamine on näidanud potentsiaali selle rakuliini invasiivsuse ja proliferatsiooni vähendamiseks, mis toetab selle kasutamist mudelina uute vähivastaste strateegiate katsetamiseks. Need leiud rõhutavad HCC1143 väärtust nii ravivastuste kui ka TNBC ravimresistentsust põhjustava rakudünaamika uurimisel.

Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • HCC-1143
  • Hamon Cancer Center 1144

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakk

04Tunnused

Viide
HCC1143 (Cytioni katalooginumber 305545)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1245

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Epiteeli glükoproteiin 2 (EGP2), tsütokeratiin 19
Onkogeenid
Her2/neu-, p53+
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Arg248Gln (c.743G>A), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
3 kuni 4 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
52 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia