Siirry sisältöön
22RV1
Kudos
Eturauhanen
Sairaus
Eturauhasen syöpä
Synonyymit
22Rv1, 22Rv-1, 22rV1, CWR-22rv1, CWR22-Rv1, CWR22R-V1, CWR22-R1, CWR22Rv1, CWR22R

Asiakirjat

22RV1

Cell line · Tuotenumero 305037

The 22Rv1 cell line is a human prostate carcinoma cell line that was established from a xenograft initiated by the inoculation of a hormone-refractory pro...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

22Rv1-solulinja on ihmisen eturauhaskarsinooma-solulinja, joka perustettiin ksenograftista, joka on saatu aikaan inokuloimalla hormoniresistentti eturauhassyöpäsolulinja CWR22:ta atyymisiin nude-hiiriin. CWR22-ksenotransplantaatti oli peräisin primaarisesta eturauhaskarsinoomasta. Kastroinnin jälkeen tapahtuneen taantumisen ja sitä seuranneen uusiutumisen jälkeen uusiutuneesta kasvaimesta muodostettiin 22Rv1-solulinja, jolla oli androgeenista riippumaton kasvu.

22Rv1-solut ilmentävät androgeenireseptoria (AR) ja eturauhasspesifistä antigeenia (PSA), jotka ovat eturauhassyövän tutkimuksessa ja terapeuttisessa kohdentamisessa keskeisiä merkkiaineita. Erityisesti tämä solulinja sisältää AR:n muunnosmuodon, joka tunnetaan nimellä AR-V7. Tästä spliisivariantista puuttuu ligandia sitova domeeni, minkä ansiosta se voi pysyä konstitutiivisesti aktiivisena ja edistää 22Rv1-solujen androgeeniriippumatonta proliferaatiota, mikä on kriittinen tekijä kastraatioresistentissä eturauhassyövässä (CRPC).

22Rv1-solulinjaa käytetään laajalti tutkimaan mekanismeja, jotka ovat taustalla siirtymisessä androgeeniriippuvaisesta androgeeniriippumattomaan eturauhassyövän kasvuun, mikä on keskeinen haaste pitkälle edenneen eturauhassyövän hoidossa. 22Rv1-solut ovat edistäneet merkittävästi CRPC:n molekyylibiologian ymmärtämistä, mukaan lukien AR-varianttien merkitys androgeeninpoistohoidon (ADT) vastustuskyvyssä ja uusien terapeuttisten strategioiden kehittäminen tämän vastustuskyvyn voittamiseksi.

Yhteenvetona voidaan todeta, että 22Rv1-solulinja toimii kriittisenä mallina CRPC:n tutkimisessa. Näillä soluilla on androgeeniriippumaton kasvu, ja ne ilmentävät keskeisiä eturauhassyövän merkkiaineita, kuten AR:ää ja PSA:ta, ja ne sisältävät erityisesti AR-V7-muunnosta, joka on konstitutiivisesti aktiivinen, koska ligandia sitova domeeni puuttuu. 22Rv1-solulinjan ainutlaatuisten ominaisuuksien ansiosta se on korvaamaton eturauhassyövän siirtymisen tutkimisessa androgeeniriippuvaisesta kasvusta riippumattomaan kasvuun, mikä auttaa kehittämään uusia terapeuttisia lähestymistapoja taudin pitkälle edenneisiin vaiheisiin.

Kudos
Eturauhanen
Sairaus
Eturauhasen syöpä
Synonyymit
  • 22Rv1
  • 22Rv-1
  • 22rV1
  • CWR-22rv1
  • CWR22-Rv1
  • CWR22R-V1
  • CWR22-R1
  • CWR22Rv1
  • CWR22R

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä
Kaksinkertaistumisaika
40-60 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
22RV1 (Cytionin tuotenumero 305037)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1045

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Eturauhaspesifinen antigeeni (PSA)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset
Etnisyys
Eurooppalainen