Pāriet uz saturu
22RV1
Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas karcinoma
Sinonīmi
22Rv1, 22Rv-1, 22rV1, CWR-22rv1, CWR22-Rv1, CWR22R-V1, CWR22-R1, CWR22Rv1, CWR22R

Dokumenti

22RV1

Cell line · Preces numurs 305037

The 22Rv1 cell line is a human prostate carcinoma cell line that was established from a xenograft initiated by the inoculation of a hormone-refractory pro...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

22Rv1 šūnu līnija ir cilvēka prostatas karcinomas šūnu līnija, kas tika izveidota no ksenogrāfta, kurš tika iegūts, inokulējot hormonrefraktāru prostatas vēža šūnu līniju CWR22 athimiskām nude pelēm. CWR22 ksenogrāfts tika iegūts no primārās prostatas karcinomas. Pēc regresijas pēc kastrācijas un sekojoša recidīva no recidīva audzēja tika izveidota 22Rv1 šūnu līnija, kas uzrādīja no androgēniem neatkarīgu augšanu.

22Rv1 šūnas ekspresē androgēnu receptoru (AR) un prostatas specifisko antigēnu (PSA), kas ir būtiski marķieri prostatas vēža pētniecībā un terapeitiskajā mērķterapijā. Šī šūnu līnija satur AR variantu, kas pazīstams kā AR-V7. Šim sazarojuma variantam trūkst ligandu saistošā domēna, kas ļauj tam palikt konstitutīvi aktīvam un veicināt no androgēniem neatkarīgu 22Rv1 šūnu proliferāciju, kas ir būtisks kastrācijai rezistenta prostatas vēža (CRPC) aspekts.

22Rv1 šūnu līniju plaši izmanto, lai pētītu mehānismus, kas ir pamatā pārejai no androgēnneatkarīgas uz androgēnneatkarīgu prostatas vēža augšanu, kas ir galvenā problēma progresējuša prostatas vēža ārstēšanā. 22Rv1 šūnas ir veicinājušas nozīmīgu progresu CRPC molekulārās bioloģijas izpratnē, tostarp AR variantu nozīmi rezistences pret androgēnu deprivacijas terapiju (ADT) veidošanā un jaunu terapeitisko stratēģiju izstrādē, lai pārvarētu šo rezistenci.

Kopumā 22Rv1 šūnu līnija kalpo kā ļoti svarīgs modelis CRPC izpētei. Šīm šūnām raksturīga no androgēniem neatkarīga augšana, tās ekspresē galvenos prostatas vēža marķierus, piemēram, AR un PSA, un tajās ir AR-V7 variants, kas ir konstitutīvi aktīvs, jo nav ligandu saistošā domēna. 22Rv1 šūnu līnijas unikālās īpašības padara to nenovērtējamu, lai izpētītu pāreju no androgēnneatkarīgas uz neatkarīgu prostatas vēža augšanu un tādējādi palīdzētu izstrādāt jaunas terapeitiskās pieejas, lai cīnītos ar progresējošām slimības stadijām.

Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas karcinoma
Sinonīmi
  • 22Rv1
  • 22Rv-1
  • 22rV1
  • CWR-22rv1
  • CWR22-Rv1
  • CWR22R-V1
  • CWR22-R1
  • CWR22Rv1
  • CWR22R

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
40 līdz 60 stundas

04Identifikatori

Atsauce
22RV1 (Cytion kataloga numurs 305037)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1045

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Prostatas specifiskais antigēns (PSA)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo
Etniskā piederība
Eiropas