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Cellules GCT
Tissu
Poumon
Maladie
Sarcome pléomorphe indifférencié
Site métastatique
Épanchement pleural
Synonymes
Giant Cell Tumor

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Cellules GCT

Cell line · Référence du produit 300155

La lignée cellulaire GCT, issue d'une tumeur à cellules géantes (GCT) prélevée dans le poumon d'un patient adulte de sexe masculin atteint d'un histiocytome fibreux, est réputée pour...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
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01Informations générales

Description

La lignée cellulaire GCT, issue d'une tumeur à cellules géantes (GCT) isolée du poumon d'un homme adulte atteint d'un histiocytome fibreux, est réputée pour son activité biologique robuste dans le domaine de la recherche médicale. Cette lignée produit une activité stimulant les colonies (CSA) pour les précurseurs granulocytaires humains et une activité érythroïde semblable à l'érythropoïétine (EEA) pour les précurseurs érythroïdes, ce qui la rend inestimable pour l'étude de la régulation et du développement des cellules hématopoïétiques. Les précurseurs granulocytaires et érythroïdes ciblés par les produits de la lignée cellulaire GCT sont essentiels pour comprendre des processus tels que la fonction des neutrophiles dans la réponse immunitaire et la formation des globules rouges, respectivement.

En outre, le milieu conditionné par cette lignée cellulaire est une source importante de prostaglandine E et d'activateur du plasminogène. Ces substances jouent un rôle crucial dans les réponses inflammatoires et la voie fibrinolytique, respectivement. La prostaglandine E est essentielle à la modulation de l'inflammation et au maintien de l'équilibre physiologique, tandis que l'activateur du plasminogène contribue à la dissolution des caillots sanguins. La présence de ces facteurs dans le milieu conditionné de la lignée cellulaire GCT souligne son potentiel pour le développement de stratégies thérapeutiques contre les maladies cardiovasculaires et les affections liées à la formation excessive de caillots et à l'inflammation.

Tissu
Poumon
Maladie
Sarcome pléomorphe indifférencié
Site métastatique
Épanchement pleural
Synonymes
  • Giant Cell Tumor

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
GCT (numéro de catalogue Cytion 300155)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Manipulation et culture

Milieu de culture
McCoys 5a, w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820200a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 à 2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

06Donateur

Âge du donneur
29 ans