Gå direkte til indholdet
GCT-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Udifferentieret pleomorf sarkom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
Giant Cell Tumor

Dokumenter

GCT-celler

Cell line · Varenummer 300155

GCT-cellelinjen, der stammer fra en gigantcelle-tumor (GCT) isoleret fra lungen hos en voksen mandlig patient med fibrøst histiocytom, er kendt for sin...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

GCT-cellelinjen, der stammer fra en kæmpecelletumor (GCT) isoleret fra lungen hos en voksen mandlig patient med fibrøst histiocytom, er kendt for sin robuste biologiske aktivitet inden for medicinsk forskning. Denne linje producerer kolonistimulerende aktivitet (CSA) for humane granulocytforstadier og erytropoietinlignende erytroidaktivitet (EEA) for erytroidforstadier, hvilket gør den uvurderlig til undersøgelse af regulering og udvikling af hæmatopoietiske celler. De granulocyt- og erythroidforstadier, som GCT-cellelinjens produkter er rettet mod, er nøglen til at forstå processer som neutrofil funktion i henholdsvis immunresponsen og dannelsen af røde blodlegemer.

Derudover er mediet fra denne cellelinje en væsentlig kilde til prostaglandin E og plasminogenaktivator. Disse stoffer spiller en afgørende rolle i henholdsvis inflammatoriske reaktioner og den fibrinolytiske vej. Prostaglandin E er afgørende for inflammatorisk modulation og opretholdelse af fysiologisk balance, mens plasminogenaktivator bidrager til opløsning af blodpropper. Tilstedeværelsen af disse faktorer i GCT-cellelinjens konditionerede medium understreger dens potentiale for at udvikle terapeutiske strategier mod hjerte-kar-sygdomme og tilstande, der er relateret til overdreven blodpropdannelse og inflammation.

Væv
Lunge
Sygdom
Udifferentieret pleomorf sarkom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • Giant Cell Tumor

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
GCT (Cytion katalognummer 300155)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Donorens alder
29 år