Siirry sisältöön
GCT-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Erilaistumaton pleomorfinen sarkooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
Giant Cell Tumor

Asiakirjat

GCT-solut

Cell line · Tuotenumero 300155

GCT-solulinja, joka on peräisin jättisolutuumorista (GCT), joka eristettiin fibroottista histiosytoomaa sairastavan aikuisen miespotilaan keuhkoista, tunnetaan...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

GCT-solulinja, joka on peräisin aikuisen miespotilaan keuhkoista eristetystä jättisolukasvaimesta (GCT), on tunnettu vahvasta biologisesta aktiivisuudestaan lääketieteellisen tutkimuksen alalla. Tämä linja tuottaa Colony Stimulating Activity (CSA) -aktiivisuutta ihmisen granulosyyttien esiasteille ja Erythropoietin-like Erythroid Activity (EEA) -aktiivisuutta erytroidien esiasteille, mikä tekee siitä korvaamattoman arvokkaan hematopoieettisten solujen säätelyn ja kehityksen tutkimisessa. GCT-solulinjan tuotteiden kohteena olevat granulosyyttien ja erytroidien esiasteet ovat avainasemassa ymmärrettäessä prosesseja, kuten neutrofiilien toimintaa immuunivasteessa ja punasolujen muodostumista.

Lisäksi tämän solulinjan konditionoima väliaine on merkittävä prostaglandiini E:n ja plasminogeeniaktivaattorin lähde. Näillä aineilla on ratkaiseva rooli tulehdusreaktioissa ja fibrinolyyttisessä reitissä. Prostaglandiini E on välttämätön tulehduksen säätelyssä ja fysiologisen tasapainon ylläpitämisessä, kun taas plasminogeeniaktivaattori edistää verihyytymien hajoamista. Näiden tekijöiden esiintyminen GCT-solulinjan konditionoidussa väliaineessa korostaa sen mahdollisuuksia kehittää terapeuttisia strategioita sydän- ja verisuonitauteihin sekä liialliseen hyytymien muodostumiseen ja tulehdukseen liittyviin tiloihin.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Erilaistumaton pleomorfinen sarkooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • Giant Cell Tumor

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
GCT (Cytionin luettelonumero 300155)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
29 vuotta