Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα GCT
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδιαφοροποίητο πλειομορφικό σάρκωμα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
Giant Cell Tumor

Έγγραφα

Κύτταρα GCT

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300155

Η κυτταρική σειρά GCT, η οποία προέρχεται από έναν όγκο γιγαντοκυττάρων (GCT) που απομονώθηκε από τον πνεύμονα ενός ενήλικου άνδρα ασθενούς με ινώδες ιστιοκύτωμα, είναι γνωστή για...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά GCT, προερχόμενη από έναν γιγαντοκυτταρικό όγκο (GCT) που απομονώθηκε από τον πνεύμονα ενός ενήλικου άνδρα ασθενούς με ινώδες ιστιοκύττωμα, είναι γνωστή για την ισχυρή βιολογική της δραστηριότητα στον τομέα της ιατρικής έρευνας. Η γραμμή αυτή παράγει Colony Stimulating Activity (CSA) για πρόδρομα ανθρώπινα κοκκιοκύτταρα και Erythropoietin-like Erythroid Activity (EEA) για πρόδρομα ερυθροειδή, καθιστώντας την ανεκτίμητη για τη μελέτη της ρύθμισης και της ανάπτυξης των αιμοποιητικών κυττάρων. Οι πρόδρομες μορφές των κοκκιοκυττάρων και των ερυθροειδών, στις οποίες στοχεύουν τα προϊόντα της κυτταρικής σειράς GCT, αποτελούν κλειδί για την κατανόηση διαδικασιών όπως η λειτουργία των ουδετερόφιλων στην ανοσολογική απόκριση και ο σχηματισμός ερυθρών αιμοσφαιρίων, αντίστοιχα.

Επιπλέον, το μέσο που κλιματίζεται από αυτή την κυτταρική σειρά αποτελεί σημαντική πηγή προσταγλανδίνης Ε και ενεργοποιητή πλασμινογόνου. Οι ουσίες αυτές έχουν κρίσιμο ρόλο στις φλεγμονώδεις αποκρίσεις και στην ινωδολυτική οδό, αντίστοιχα. Η προσταγλανδίνη Ε είναι απαραίτητη για τη φλεγμονώδη ρύθμιση και τη διατήρηση της φυσιολογικής ισορροπίας, ενώ ο ενεργοποιητής του πλασμινογόνου συμβάλλει στη διάλυση των θρόμβων αίματος. Η παρουσία αυτών των παραγόντων στο κλιματιζόμενο μέσο της κυτταρικής σειράς GCT υπογραμμίζει τις δυνατότητές της για την ανάπτυξη θεραπευτικών στρατηγικών αντιμετώπισης καρδιαγγειακών παθήσεων και καταστάσεων που σχετίζονται με τον υπερβολικό σχηματισμό θρόμβων και τη φλεγμονή.

Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδιαφοροποίητο πλειομορφικό σάρκωμα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
  • Giant Cell Tumor

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
GCT (αριθμός καταλόγου Cytion 300155)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1229

04Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
McCoys 5a, w: 3,0 g/L γλυκόζη, w: σταθερή γλουταμίνη, w: 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820200a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 2 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

06Δωρητής

Ηλικία δωρητή
29 χρόνια