Mine otse sisu juurde
GCT rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Diferentseerimata pleomorfne sarkoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
Giant Cell Tumor

Dokumendid

GCT rakud

Cell line · Toote number 300155

GCT-rakuliin, mis pärineb hiidrakulisest kasvajast (GCT), mis isoleeriti fibroosse histiotsütoomiga täiskasvanud meespatsiendi kopsust, on tuntud oma...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

GCT rakuliin, mis pärineb täiskasvanud meessoost fibroosse histiotsütoomiga patsiendi kopsust isoleeritud hiiglasliku raku kasvajast (GCT), on tuntud oma tugeva bioloogilise aktiivsuse poolest meditsiiniuuringute valdkonnas. See liin toodab inimese granulotsüütide eellaste kolooniaid stimuleerivat aktiivsust (CSA) ja erütropoetiinilaadset erütrooidset aktiivsust (EEA), mis muudab selle hindamatuks vereloome rakkude regulatsiooni ja arengu uurimiseks. Granulotsüütide ja erütrooidide eelkäijad, millele GCT rakuliini tooted on suunatud, on võtmetähtsusega selliste protsesside mõistmiseks nagu neutrofiilide funktsioon immuunvastuses ja punaste vererakkude moodustamine.

Lisaks sellele on selle rakuliini poolt konditsioneeritud keskkond oluline prostaglandiin E ja plasminogeeni aktivaatori allikas. Need ained mängivad otsustavat rolli vastavalt põletikureaktsioonis ja fibrinolüütilises rajas. Prostaglandiin E on oluline põletiku moduleerimiseks ja füsioloogilise tasakaalu säilitamiseks, samas kui plasminogeeni aktivaator aitab kaasa verehüüvete lahustumisele. Nende tegurite olemasolu GCT rakuliini konditsioneeritud keskkonnas rõhutab selle potentsiaali terapeutiliste strateegiate väljatöötamisel, mis on suunatud südame-veresoonkonna haiguste ja liigse trombide moodustumise ja põletikuga seotud seisundite raviks.

Kude
Kopsud
Haigus
Diferentseerimata pleomorfne sarkoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • Giant Cell Tumor

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
GCT (Cytioni katalooginumber 300155)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
29 aastat