Премини към съдържанието
Клетки на GCT
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Недиференциран плеоморфен сарком
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
Giant Cell Tumor

Документи

Клетки на GCT

Cell line · Номер на продукта 300155

Клетъчната линия GCT, произхождаща от гигантоклетъчен тумор (GCT), изолиран от белия дроб на възрастен мъж с фиброзен хистиоцитом, е известна с това, че...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия GCT, произхождаща от гигантски клетъчен тумор (GCT), изолиран от белия дроб на възрастен пациент от мъжки пол с фиброзен хистиоцитом, е известна със силната си биологична активност в областта на медицинските изследвания. Тази линия произвежда колониално стимулираща активност (CSA) за човешките гранулоцитни прекурсори и еритропоетин-подобна еритроидна активност (EEA) за еритроидните прекурсори, което я прави безценна за изучаване на регулацията и развитието на хемопоетичните клетки. Гранулоцитните и еритроидните прекурсори, към които са насочени продуктите на клетъчната линия GCT, са от ключово значение за разбирането на процеси като функцията на неутрофилите в имунния отговор и образуването на червени кръвни клетки.

Освен това средата, кондиционирана от тази клетъчна линия, е значителен източник на простагландин Е и плазминогенен активатор. Тези вещества имат решаваща роля във възпалителните реакции и съответно във фибринолитичния път. Простагландин Е е от съществено значение за възпалителната модулация и поддържането на физиологичното равновесие, докато плазминогенният активатор допринася за разтварянето на кръвните съсиреци. Наличието на тези фактори в кондиционираната среда на клетъчната линия GCT подчертава нейния потенциал за разработване на терапевтични стратегии, насочени към сърдечносъдови заболявания и състояния, свързани с прекомерно образуване на съсиреци и възпаление.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Недиференциран плеоморфен сарком
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • Giant Cell Tumor

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Идентификатори

Източник
GCT (каталожен номер 300155 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1229

04Обработка и отглеждане

Хранителна среда
McCoys 5a, w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820200a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 2 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

06Дарител

Възраст на донора
29 години