Pāriet uz saturu
GCT šūnas
Audums
Plaušas
Slimība
Nediferencēta pleomorfā sarkoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
Giant Cell Tumor

Dokumenti

GCT šūnas

Cell line · Preces numurs 300155

GCT šūnu līnija, kas iegūta no milzu šūnu audzēja (GCT), kurš izdalīts no pieauguša vīrieša plaušas, kam bija fibrozo histiocitoma, ir pazīstama ar to, ka...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

GCT šūnu līnija, kas iegūta no milzu šūnu audzēja (GCT), kurš izolēts no plaušām pieaugušam vīrietim ar fibrozu histiocitomu, ir pazīstama ar savu spēcīgo bioloģisko aktivitāti medicīnas pētījumu jomā. Šī līnija rada koloniju stimulējošo aktivitāti (CSA) cilvēka granulocītu prekursoriem un eritropoetīnam līdzīgo eritroīdu aktivitāti (EEA) eritroīdu prekursoriem, padarot to nenovērtējamu asinsrades šūnu regulācijas un attīstības izpētē. Granulocītu un eritroīdu prekursori, uz kuriem ir vērsti GCT šūnu līnijas produkti, ir būtiski, lai izprastu tādus procesus kā neitrofilu funkcija imūnā reakcijā un eritrocītu veidošanās.

Turklāt šīs šūnu līnijas kondicionētā barotne ir nozīmīgs prostaglandīna E un plazminogēna aktivatora avots. Šīm vielām ir izšķiroša nozīme attiecīgi iekaisuma reakcijās un fibrinolītiskajā ceļā. Prostaglandīns E ir būtisks iekaisuma modulācijai un fizioloģiskā līdzsvara uzturēšanai, bet plazminogēna aktivators veicina asins recekļu šķīdināšanu. Šo faktoru klātbūtne GCT šūnu līnijas kondicionētajā barotnē uzsver tās potenciālu terapeitisko stratēģiju izstrādē, lai risinātu sirds un asinsvadu slimību un stāvokļu, kas saistīti ar pārmērīgu trombu veidošanos un iekaisumu, problēmas.

Audums
Plaušas
Slimība
Nediferencēta pleomorfā sarkoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • Giant Cell Tumor

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
GCT (Cytion kataloga numurs 300155)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
29 gadi