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Cellules L-591
Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Lymphome hodgkinien
Synonymes
L 591, L591

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Cellules L-591

Cell line · Référence du produit 300202

La lignée cellulaire L-591 fait partie des différentes lignées cellulaires néoplasiques issues de patients atteints de la maladie de Hodgkin, plus précisément du sous-type sclérosant nodulaire. ...

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01Informations générales

Description

La lignée cellulaire L-591 est l'une des nombreuses lignées cellulaires néoplasiques dérivées de patients atteints de la maladie de Hodgkin, plus précisément du sous-type sclérosant nodulaire. Elle a été créée dans le cadre d'un groupe de lignées cellulaires de lymphome de Hodgkin, comprenant les lignées L-428 et L-540, et a contribué à faire progresser la compréhension de cette tumeur hématologique maligne. Les cellules L-591 sont caractérisées par l'aneuploïdie et présentent diverses anomalies chromosomiques structurelles et numériques, qui indiquent leur origine néoplasique. Cette lignée est particulièrement précieuse pour la recherche en raison de ses profils chromosomiques distincts et de sa capacité à proliférer in vitro, ce qui en fait un modèle fiable pour l'étude des mécanismes cellulaires du lymphome de Hodgkin.

L'une des caractéristiques des cellules L-591 est leur immunophénotype. Les cellules expriment des antigènes de type Ia et des récepteurs associés aux cellules T, mais manquent de marqueurs typiques d'autres lignées hématopoïétiques, telles que les cellules myéloïdes, les monocytes et les macrophages. Notamment, les cellules L-591 ne produisent pas d'immunoglobulines de surface ou cytoplasmiques et ne présentent pas d'antigènes spécifiques du virus d'Epstein-Barr (EBV), tels que l'EBNA. Cette absence d'immunoglobulines et d'antigènes EBV distingue la lignée cellulaire L-591 des autres lignées cellulaires de lymphome de Hodgkin positives à l'EBV et souligne son utilité dans l'exploration des spécificités de la pathologie du lymphome de Hodgkin qui sont indépendantes de l'infection par l'EBV.

La lignée cellulaire L-591 est morphologiquement similaire aux cellules de Reed-Sternberg (RS) et de Hodgkin (H) qui sont caractéristiques du lymphome de Hodgkin. Ces cellules jouent un rôle crucial dans la recherche sur la maladie de Hodgkin, servant de modèle pour comprendre la pathogenèse de la maladie et pour identifier des cibles thérapeutiques potentielles. Les caractéristiques uniques du L-591, combinées à son utilisation établie en laboratoire, en font un outil essentiel dans l'étude du lymphome de Hodgkin, contribuant de manière significative à l'ensemble des connaissances entourant cette tumeur maligne complexe.

Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Lymphome hodgkinien
Synonymes
  • L 591
  • L591

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules rondes
Type de cellule
Lymphoblaste

04Identifiants

Référence
L-591 (numéro de catalogue Cytion 300202)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1867

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 1 % de NEAA
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
3 x 105/ml
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
31 ans