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Células L-591
Tecido
Derrame pleural
Doença
Linfoma de Hodgkin
Sinónimos
L 591, L591

Documentos

Células L-591

Cell line · Número do produto 300202

A linha celular L-591 é uma das várias linhas celulares neoplásicas derivadas de doentes com doença de Hodgkin, mais concretamente do subtipo nodular esclerosante. ...

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01Informações gerais

Descrição

A linha de células L-591 é uma das várias linhas de células neoplásicas derivadas de doentes com doença de Hodgkin, especificamente do subtipo nodular esclerosante. Foi estabelecida como parte de um grupo de linhas celulares de linfoma de Hodgkin, incluindo a L-428 e a L-540, e tem sido fundamental para o avanço da compreensão desta doença maligna hematológica. As células L-591 são caracterizadas por aneuploidia e apresentam várias anomalias cromossómicas estruturais e numéricas, que são indicativas da sua origem neoplásica. A linha é particularmente valiosa para a investigação devido aos seus padrões cromossómicos distintos e à sua capacidade de proliferação in vitro, o que a torna um modelo fiável para o estudo dos mecanismos celulares do linfoma de Hodgkin.

Uma das caraterísticas que definem as células L-591 é o seu imunofenótipo. As células expressam antigénios e receptores do tipo Ia associados às células T, mas não possuem marcadores típicos de outras linhagens hematopoiéticas, como as células mielóides, os monócitos e os macrófagos. Em particular, as células L-591 não produzem imunoglobulinas de superfície ou citoplasmáticas, nem apresentam antigénios específicos do vírus Epstein-Barr (EBV), como o EBNA. Esta ausência de imunoglobulinas e de antigénios do EBV distingue a L-591 de outras linhas celulares de linfoma de Hodgkin EBV-positivas e realça a sua utilidade na exploração das especificidades da patologia do linfoma de Hodgkin que são independentes da infeção pelo EBV.

A linha celular L-591 é morfologicamente semelhante às células Reed-Sternberg (RS) e Hodgkin (H) que são caraterísticas do linfoma de Hodgkin. Estas células desempenham um papel crucial na investigação da doença de Hodgkin, servindo de modelo para a compreensão da patogénese da doença e para a identificação de potenciais alvos terapêuticos. As caraterísticas únicas da L-591, combinadas com a sua utilização estabelecida em ambientes laboratoriais, fazem dela uma ferramenta essencial no estudo do linfoma de Hodgkin, contribuindo significativamente para o conjunto de conhecimentos sobre esta doença maligna complexa.

Tecido
Derrame pleural
Doença
Linfoma de Hodgkin
Sinónimos
  • L 591
  • L591

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Células redondas
Tipo de célula
Linfoblasto

04Identificadores

Referência
L-591 (número de catálogo Cytion 300202)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1867

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 1% de NEAA
Subcultura
Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
Densidade de sementeira
3x105/ml
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
31 anos