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CCRF-CEM-C7
Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta T dell'infanzia
Sinonimi
CCRF-CEM C7, CCRF/CEM-C7, CEM-C7, CEM C7, CEMC7, CEM clone 7

Documenti

CCRF-CEM-C7

Cell line · Codice prodotto 300398

La linea cellulare CCRF-CEM-C7 è un clone derivato dalla linea cellulare madre CCRF-CEM, che a sua volta ha origine da una leucemia linfoblastica acuta (LLA) umana...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CCRF-CEM-C7 è un clone derivato dalla linea cellulare madre CCRF-CEM, che a sua volta proviene da una leucemia linfoblastica acuta (ALL) umana di tipo T. Questa linea cellulare è stata creata a partire da sangue periferico prelevato da una paziente femmina di 4 anni affetta da ALL. La linea cellulare CCRF-CEM-C7 è ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica, in particolare negli studi sulla biologia del cancro, sullo screening dei farmaci e sui meccanismi di resistenza alla chemioterapia.

Le cellule CCRF-CEM-C7 sono caratterizzate da una crescita robusta in vitro e sono comunemente utilizzate per valutare la citotossicità dei composti antitumorali. Queste cellule esprimono diversi marcatori chiave dello sviluppo delle cellule T e sono spesso utilizzate per studiare la patogenesi della leucemia a cellule T, le vie di segnalazione delle cellule T e le risposte cellulari ai danni al DNA. La linea è stata anche importante negli studi che hanno indagato il ruolo dell'apoptosi nelle cellule tumorali, rendendola una risorsa preziosa per comprendere i meccanismi della morte cellulare programmata in risposta agli agenti terapeutici.

Data la sua origine e le sue caratteristiche, il CCRF-CEM-C7 funge da sistema modello per la leucemia linfoblastica acuta a cellule T, fornendo approfondimenti sul comportamento biologico di questa neoplasia e offrendo una piattaforma per testare strategie terapeutiche mirate a percorsi cellulari specifici delle neoplasie a cellule T.

Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta T dell'infanzia
Sinonimi
  • CCRF-CEM C7
  • CCRF/CEM-C7
  • CEM-C7
  • CEM C7
  • CEMC7
  • CEM clone 7

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione

03Identificatori

Riferimento bibliografico
CCRF-CEM-C7 (catalogo Cytion numero 300398)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6825

04Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

06Donatore

Età dei donatori
3 anni e 11 mesi
Etnia
Caucasico