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CCRF-CEM-C7
Tecido
Sangue
Doença
Leucemia linfoblástica aguda T na infância
Sinónimos
CCRF-CEM C7, CCRF/CEM-C7, CEM-C7, CEM C7, CEMC7, CEM clone 7

Documentos

CCRF-CEM-C7

Cell line · Número do produto 300398

A linha celular CCRF-CEM-C7 é um clone derivado da linha celular parental CCRF-CEM, que, por sua vez, tem origem numa leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana...

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01Informações gerais

Descrição

A linha de células CCRF-CEM-C7 é um clone derivado da linha de células CCRF-CEM, que por sua vez é originária de uma leucemia linfoblástica aguda humana (LLA) do tipo de células T. Esta linha celular foi estabelecida a partir de sangue periférico retirado de uma doente de 4 anos com LLA. A linha celular CCRF-CEM-C7 é amplamente utilizada na investigação biomédica, nomeadamente em estudos relacionados com a biologia do cancro, o rastreio de medicamentos e os mecanismos de resistência à quimioterapia.

As células CCRF-CEM-C7 caracterizam-se pelo seu crescimento robusto in vitro e são habitualmente utilizadas para avaliar a citotoxicidade de compostos anticancerígenos. Estas células expressam vários marcadores-chave do desenvolvimento das células T e são frequentemente utilizadas para investigar a patogénese da leucemia das células T, as vias de sinalização das células T e as respostas celulares aos danos no ADN. A linha também tem sido importante em estudos que investigam o papel da apoptose nas células cancerosas, o que a torna um recurso valioso para a compreensão dos mecanismos de morte celular programada em resposta a agentes terapêuticos.

Dada a sua origem e caraterísticas, a CCRF-CEM-C7 serve como um sistema modelo para a leucemia linfoblástica aguda de células T, fornecendo conhecimentos sobre o comportamento biológico desta neoplasia maligna e oferecendo uma plataforma para testar estratégias terapêuticas que visem vias celulares específicas de neoplasias malignas de células T.

Tecido
Sangue
Doença
Leucemia linfoblástica aguda T na infância
Sinónimos
  • CCRF-CEM C7
  • CCRF/CEM-C7
  • CEM-C7
  • CEM C7
  • CEMC7
  • CEM clone 7

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão

03Identificadores

Referência
CCRF-CEM-C7 (número de catálogo Cytion 300398)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6825

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
3 anos 11 meses
Etnia
Caucasiano