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ES-2
Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma ovarico a cellule chiare
Sinonimi
ES2

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ES-2

Cell line · Codice prodotto 305038

The ES-2 cell line is derived from a poorly differentiated ovarian clear cell carcinoma, offering a unique in vitro model to study the biological behavior...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare ES-2 deriva da un carcinoma ovarico a cellule chiare scarsamente differenziato, offrendo un modello unico in vitro per studiare i comportamenti biologici e le risposte ai trattamenti di questo sottotipo di cancro aggressivo. Originariamente coltivate in soft agar, un metodo che favorisce la crescita delle cellule tumorali e sopprime la crescita dei fibroblasti, le cellule ES-2 forniscono un sistema robusto per analizzare le interazioni tra cellule tumorali e i meccanismi di resistenza ai farmaci in una matrice tridimensionale che imita da vicino l'ambiente in vivo.

Dal punto di vista farmacologico, le cellule ES-2 mostrano una resistenza da bassa a moderata a diversi agenti chemioterapici, tra cui doxorubicina, cisplatino, carmustina, etoposide e cianomorfolinossidorubicina (MRA-CN). Questo profilo di resistenza rende ES-2 uno strumento essenziale per la ricerca oncologica, in particolare per lo sviluppo e la sperimentazione di nuovi regimi chemioterapici e terapie di combinazione. Inoltre, l'espressione della P-glicoproteina nelle cellule ES-2 è bassa, il che è significativo in quanto la P-glicoproteina è spesso implicata nell'efflusso di farmaci dalle cellule tumorali, contribuendo alla resistenza multifarmaco. Lo studio delle cellule ES-2 può quindi fornire spunti per superare la resistenza ai farmaci nei carcinomi ovarici a cellule chiare.

Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma ovarico a cellule chiare
Sinonimi
  • ES2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
ES-2 (numero di catalogo Cytion 305038)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3509

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P Glicoproteina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
47 anni
Etnia
Europeo